大鼠腎成纖維細(xì)胞【Rat Kidney：Normal Kidney Fibroblasts】 產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實驗要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒 ，英文名： RANKL ELISA Kit 綠原酸  Chlorogenic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BR

小鼠核因子κB受體激活因子配基(RANκL)ELISA試劑盒 ，英文名： RANκL ELISA Kit 氯化兩面針堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  Nitidine chloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 氯化矢車菊素,(標(biāo)準(zhǔn)品）  Cyanidin Chloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒 ，英文名： NF-κB p65 ELISA Kit 羅漢果皂苷V(標(biāo)準(zhǔn)品)  Mogroside Ⅴ  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒 ，英文名： NF-κB p65 ELISA Kit 絡(luò)塞維（標(biāo)準(zhǔn)品）  Rosavin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA檢測試劑盒Mousenuclearfactor-κBp65,NF-κBp65 96T/48T 落新婦苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Astilbin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 馬錢苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Loganin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠核因子κB抑制因子α(IκBα)ELISA試劑盒 ，英文名： IκBα ELISA Kit 馬錢苷酸(標(biāo)準(zhǔn)品）  Loganic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠核轉(zhuǎn)錄因子1(AP-1)ELISA試劑盒 ，英文名： AP-1 ELISA Kit 麥冬皂苷D（標(biāo)準(zhǔn)品）  Ophiopogonin D  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠核轉(zhuǎn)錄因子kBP65(NFkBP65)ELISA試劑盒 ，英文名： NFkBP65 ELISA Kit 甾醇；(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ergosterol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
動物組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)粗提分離試劑盒10 托瑞米芬(標(biāo)準(zhǔn)品)  Toremifene   質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

VTGELISA試劑盒鯉魚卵黃蛋白原規(guī)格：96T/48T 來那替尼  Neratinib(HKI-272)  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒 ，英文名： Pro-ANP ELISA Kit 原薯蕷皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Methyl Protodioscin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠球蛋白E(IgE)ELISA檢測試劑盒MouseImmunoglobulinE,IgEELISAKit 96T/48T 纖細(xì)薯蕷皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Gracillin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)試劑盒 Human leucine-rich alpha-2 glycoprotein 1,LRG1 ELISA Kit 鹽酸育亨賓  Yohimbine HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

RatIerleukin2,IL-2ELISAKit大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 鹽酸育亨賓（標(biāo)準(zhǔn)品）  Yohimbine HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

PASE-9蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25 甲磺酸酚妥拉明  Phentolamine mesilate  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

MouseMacrophageInflammatoryProtein3α,MIP-3αELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 甲磺酸酚妥拉明(標(biāo)準(zhǔn)品)  Phentolamine mesilate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.5%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠前腦啡肽(PENK)ELISA試劑盒 ，英文名： PENK ELISA Kit 維羅非尼,RG7204  Vemurafenib,PLX 4032  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,B-Raf突變抑制劑

人毒性休克綜合征1(TSST-1)ELISA檢測試劑盒Humaoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISAKit 96T/48T 白花前胡素E  Praeruptorin E  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠腎成纖維細(xì)胞直銷大鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA檢測試劑盒RatAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 96T/48T 蘿芙木明堿 HPLC≥95% 20mg

大鼠血管生成素2(ANG-2)試劑盒 Rat Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit 蘿卜硫素；萊菔硫烷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sulforaphane  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA檢測試劑盒RatAngiopoietin4,ANG-4ELISAKit 96T/48T 蘿卜硫素 HPLC≥98% 20mg

大鼠血管生成素4(ANG-4)試劑盒 Rat Angiopoietin 4,ANG-4 ELISA Kit 蘿卜硫苷 HPLC≥98% 20mg

大鼠血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)試劑盒 Rat Angiopoietin-like 3,ANGPTL3 ELISA KIT 蘿巴新（標(biāo)準(zhǔn)品）  Raubasine  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

大鼠血管生成素樣蛋白6(ANGPTL6)試劑盒 Rat Angiopoietin-like 6,ANGPTL6 ELISA KIT 羅硝唑-d3  Ronidazole-d3  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

大鼠血管生成抑制因子試劑盒 Rat arresten ELISA kit 羅硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ronidazole  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠血管生長素(ANG)ELISA檢測試劑盒RatAngiogenin,ANGELISAKit 96T/48T 羅硝唑  Ronidazole  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

大鼠血管生長素(ANG)試劑盒 Rat Angiogenin,ANG ELISA Kit 羅希吐堿 HPLC≥98% 20mg

大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA檢測試劑盒Ratbradykinin,BKELISAKit 96T/48T 羅通定/左旋延胡索乙素/左旋四氫巴馬汀(標(biāo)準(zhǔn)品）  Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
注意事項：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。