當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷 | T25m2 | CS-963885 |
大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞【Rat Aorta:Normal Aortic Endothelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
小鼠血管內(nèi)皮鈣黏蛋白(CDH5)ELISA試劑盒 ,英文名: CDH5 ELISA Kit 一氧化硅(>99%,BR) Silicon monoxide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFA ELISA Kit 鎢硅酸(>98%,BR) Silicotungstic acid hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGFB)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFB ELISA Kit 乙酸銀(>99%,BR) Silver acetate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠血管內(nèi)皮生長因子C(VEGFC)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFC ELISA Kit 氯化銀(>99%,BC) Silver chloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC
小鼠血管內(nèi)皮生長因子D(VEGFD)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFD ELISA Kit 偏釩酸銀(>98%,BR) Silver metavanadate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR1)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR1 ELISA Kit 銀粉(200目)(>99.5%,EP) Silver powder 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,EP
小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR2)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR2 ELISA Kit 5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉(>98%,BR) 5-nitroguaiacolate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR3 ELISA Kit 苯亞磺酸鈉(>98%,BR) benzenesulfinate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR)ELISA試劑盒 ,英文名: PROCR ELISA Kit 鉍酸鈉(>80%,BC) bismuthate 質(zhì)量規(guī)格:>80%,BC
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA檢測試劑盒MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGF 96T/48T 泛影酸鈉(>98%,BC) diatrizoate dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
動物組織超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒50 O-去甲文拉法辛(D,L) O-Desmethylvenlaine(DL) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
SheepIerleukin1β,IL-1βELISA試劑盒綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氟米松 Flumethasone 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠趨化因子5(CCL5/RAES)ELISA試劑盒 ,英文名: CCL5/RAES ELISA Kit 氟米松(標(biāo)準(zhǔn)品) Flumethasone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA檢測試劑盒MouseNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 96T/48T 鹽酸利托君 Ritodrine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)試劑盒 Human Caldesmon,CALD ELISA Kit 鹽酸利托君(標(biāo)準(zhǔn)品) Ritodrine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatIerleukin13,IL-13ELISAKit大鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硫酸茚地那韋 Indinavir sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>97%
PASE-5蛋白共沉淀分析試劑盒5 他唑巴坦鈉 Tazobactam 質(zhì)量規(guī)格:含量>90%%,BR
Mouselymphotactin,Lptn/LTNELISA試劑盒小鼠細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 他唑巴坦鈉 (標(biāo)準(zhǔn)品) Tazobactam 質(zhì)量規(guī)格:含量測定,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒 ,英文名: fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit D-環(huán)絲氨酸 D-Cycloserine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,效價>900µg/mg,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA檢測試劑盒MouseProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit 96T/48T D-環(huán)絲氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品) D-Cycloserine 質(zhì)量規(guī)格:標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定
大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷大鼠維生素D(VD)ELISA檢測試劑盒RatVitaminD,VDELISAKit 96T/48T 氯化失車菊素O蕓香糖苷 HPLC≥95% 20mg
大鼠維生素D(VD)試劑盒 Rat Vitamin D,VD ELISA Kit 氯化失車菊素O桑布雙糖苷 HPLC≥95% 20mg
大鼠維生素D2(VD2)ELISA檢測試劑盒RatVitaminD2,VD2ELISAKit 96T/48T 氯化失車菊素,O雙葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg
大鼠維生素D2(VD2)試劑盒 Rat Vitamin D2,VD2 ELISA Kit 氯化芍藥素O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg
大鼠維生素D3(VD3)ELISA檢測試劑盒RatVitaminD3,VD3ELISAKit 96T/48T 氯化芍藥素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg
大鼠維生素D3(VD3)試劑盒 Rat Vitamin D3,VD3 ELISA Kit 氯化芍藥素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg
大鼠維生素D結(jié)合蛋白(DBP)試劑盒 Rat Vitamin D-binding protein,DBP ELISA Kit 氯化銫 Cesium chloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級
大鼠維生素E(VE)ELISA檢測試劑盒RatVitaminE,VEELISAKit 96T/48T 氯化銣(分子生物學(xué)級) Rubidium chloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級
大鼠維生素E(VE)試劑盒 Rat Vitamin E ELISA Kit 氯化鉛(>99%,BR) Lead (II) chloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
大鼠維生素K1(VK1)ELISA檢測試劑盒RatVitaminK1,VK1ELISAKit 96T/48T 氯化鈀 Palladium (II) chloride 質(zhì)量規(guī)格:BC
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
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