當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2大鼠腎足突細(xì)胞操作
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠腎足突細(xì)胞操作 | T25m2 | CS-963896 |
大鼠腎足突細(xì)胞【Rat Kidney: Kidney Podocytes】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)NN-T4人新生甲狀腺素規(guī)格:48T/96T 羅漢松樹脂酚 HPLC≥98% 20mg
NOS人合成酶規(guī)格:48T/96T 羅紅霉素 HPLC≥98% 200mg
NP-Y人神經(jīng)肽Y規(guī)格:48T/96T 羅通定 HPLC≥98% 20mg
NSE人神經(jīng)特異性烯醇化酶規(guī)格:48T/96T 羅希吐堿 HPLC≥98% 20mg
N-TSH人新生兒促甲狀腺素規(guī)格:48T/96T 蘿卜硫苷 HPLC≥98% 20mg
OLAb人氧化低密度脂蛋白抗體規(guī)格:48T/96T 蘿卜硫素 HPLC≥98% 20mg
omein人網(wǎng)膜素規(guī)格:48T/96T 洛伐他汀 HPLC≥98% 20mg
OPN兔骨橋素規(guī)格:48T/96T 絡(luò)塞定 HPLC≥98% 10mg
OSM人抑瘤素M規(guī)格:48T/96T 絡(luò)塞琳 HPLC≥98% 10mg
OX-B人食欲素/阿立新B規(guī)格:48T/96T 絡(luò)塞維 HPLC≥98% 20mg
小鼠羥戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)ELISA試劑盒 ,英文名: HMG-CoA ELISA Kit D-阿拉伯糖(標(biāo)準(zhǔn)品) D-arabinose 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠球蛋白G(IgG)ELISA檢測試劑盒MouseImmunoglobulinG,IgGELISAKit 96T/48T 阿魏酸,松柏酸,反式阿魏酸 Ferulic acid 質(zhì)量規(guī)格:>99%,合成
人富組氨酸糖蛋白(HRG)試劑盒 Human histidine-rich glycoprotein,HRG ELISA kit 阿魏酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Ferulic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatIerleukin1β,IL-1βELISAKit大鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 安石榴苷 Punicalagin (40%) 質(zhì)量規(guī)格:40%,BR
PASE-8蛋白共沉淀分析試劑盒5 安石榴甙(標(biāo)準(zhǔn)品) Punicalagin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MouseMacrophageInflammatoryProtein2,MIP-2ELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸羅格列酮 Rosiglitazone HCL 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
小鼠強啡肽(Dyn)ELISA試劑盒 ,英文名: Dyn ELISA Kit 澳洲茄邊堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Solamargine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
人金葡菌腸(SE)ELISA檢測試劑盒Humanstaphylococcusaureuseerotoxins,SEELISAKit 96T/48T 澳洲茄堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Solasonine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥94.50%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)試劑盒 Rat lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit 安格洛苷 C(標(biāo)準(zhǔn)品) Angoroside C 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
英文名稱HumanP53ELISAKit人P53(P53)規(guī)格:96T/48T 托瑞米芬 Toremifene 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠腎足突細(xì)胞操作大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)試劑盒 Rat Angiotensin conveing enzyme,ACE ELISA Kit 洛伐他汀羥基酸鈉鹽 Lovastatin Hydroxy Acid, Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)試劑盒 Rat Angiotensin conveing enzyme 2,ACE2 ELISA Kit 洛伐他汀(標(biāo)準(zhǔn)品) Lovastatin,Monacolin K 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)試劑盒 Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit 洛伐他汀 HPLC≥98% 20mg
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)試劑盒 Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA kit 洛伐他汀 Lovastatin,Monacolin K 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)試劑盒 Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA kit 螺旋霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) Spiramycin 質(zhì)量規(guī)格:含量測定,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒 Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor D,VEGF-D ELISA kit 螺旋霉素 Spiramycin 質(zhì)量規(guī)格:>3900IU/MG,EP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)試劑盒 Rat Vascular endothelial cell growth factor receptor 1,VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit 螺旋霉素 HPLC≥98% 100mg
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2)試劑盒 Rat Vascular endothelial cell growth factor receptor 2,VEGFR-2/Flk-1 ELISA kit 螺內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Spironolactone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1)試劑盒 Rat vascular cell adhesion protein 1,VCAM-1/CD106 ELISA kit 螺內(nèi)酯 Spironolactone 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP 32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
大鼠血管生成素1(ANG-1)試劑盒 Rat Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit 螺[1,3,3-基吲哚苯并二氫吡喃][光致變色化合物](>98.0%(HPLC)(T)) 1,3,3-Trimethylindolinobenzopyrylospiran [Photochromic Compound] 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
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