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當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞說明

大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞說明

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產(chǎn)品型號T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-20 15:17:11瀏覽次數(shù):173次

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大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞說明收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊)
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞【Rat Lung: Normal Vein Endothelial Cells產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。

產(chǎn)品名稱

大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞說明

規(guī)格

T25m2

貨號

CS-963867

實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,375%CO2培養(yǎng)。
 RatProAialNaiureticPeptide,Pro-ANP大鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 異維A酸(標準品)  Isotretinoin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品

RatProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISA試劑盒大鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 美羅培南  Meropenem trihydrate  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,三水合物

RatprocollagenN-terminalpeptide,PNP大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 美羅培南(標準品)  Meropenem trihydrate  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品,三水合物

RatprocollagenN-terminalpeptide,PNPELISA試劑盒大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硫酸卡那霉素  Kanamycin mono sulfate  質(zhì)量規(guī)格:效價≥750IU/MG,BP,BR

RatprocollagenN-terminalpeptide,PⅢ大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(P)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硫酸卡那霉素(標準品)  Kanamycin mono sulfate  質(zhì)量規(guī)格:效價測定

RatprocollagenN-terminalpeptide,PELISA試劑盒大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(P)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 酮舍林鹽  Ketanserin Tartrate  質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR

RatProgesterone,PROG大鼠孕激素/孕同(PROG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 酮舍林鹽(標準品)  Ketanserin Tartrate  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

RatProgesterone,PROGELISA試劑盒大鼠孕激素/孕同(PROG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 酮康唑  Ketoconazole  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

Ratprogesteronereceptor,PGR大鼠孕同受體(PGR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 酮康唑(標準品)  Ketoconazole  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品

Ratprogesteronereceptor,PGRELISA試劑盒大鼠孕同受體(PGR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 霉素,柱晶白霉素  Kitasamycin  質(zhì)量規(guī)格:效價≥1300U/MG,BR
動物源性食品羊源試劑盒20 亞精胺鹽  Spermidine phosphate salt hexahydrate   質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),進口原裝

RatVitaminD2,VD2ELISA試劑盒大鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 多球殼菌素;嗜熱菌殺酵母素(來源于無孢霉群)  Myriocin from Mycelia sterilia  質(zhì)量規(guī)格:≥98%,sigma分裝

小鼠熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)ELISA試劑盒 ,英文名: HSF1 ELISA Kit 亞精胺鹽酸鹽  Spermidine tri  質(zhì)量規(guī)格:≥98%

豬透明質(zhì)酸(HA)ELISA檢測試劑盒PorcineHyaluronicacid,HAELISAKit 96T/48T 栗精胺  Castanospermine  質(zhì)量規(guī)格:>98%,進分

大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)試劑盒 Rat ansforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA kit 精胺四鹽酸鹽;鹽酸精胺  Spermine tetra  質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學級

英文名稱HumanIerleukin-15,IL-15ELISAKIT人白介素-15(IL-15)規(guī)格:96T/48T D-熒光素鉀鹽,D-蟲熒光素鉀鹽  D-Luciferin potassium  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

動物源性食品豬源試劑盒20 鹽酸雷尼替丁  Ranitidine HCl  質(zhì)量規(guī)格:>98%

RatVitaminD3,VD3ELISA試劑盒大鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸雷尼替丁(標準品)  Ranitidine HCl  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒 ,英文名: HSF1 ELISA Kit 熒光素鈉  Fluorescein di salt  質(zhì)量規(guī)格:BS

小鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA檢測試劑盒Mouseconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISAKit 96T/48T D-蟲熒光素鈉鹽;D-熒光素鈉鹽  D-Luciferin  salt  質(zhì)量規(guī)格:>98%
大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞說明大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA檢測試劑盒Ratheatshockprotein20,hSP-20ELISAKit 96T/48T 沒食子兒茶素(標準品)  GC;  (-)-gallocatechin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒 Rat heat shock protein 20,hSP-20 ELISA Kit 沒食子兒茶素 HPLC98% 20mg

大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA檢測試劑盒Ratheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit 96T/48T 茅蒼術(shù)醇 HPLC98% 20mg

大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)試劑盒 Rat heat shock protein 27,HSP-27 ELISA Kit 毛葉香茶菜丁素 HPLC98% 5mg

大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA檢測試劑盒Ratheatshockprotein40,hSP-40ELISAKit 96T/48T 毛蕊異黃酮苷(標準品)  Calycosin-7-O-β-D-glucoside  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒 Rat heat shock protein 40,hSP-40 ELISA Kit 毛蕊異黃酮苷 HPLC98% 20mg

大鼠熱休克蛋白47(HSP47)試劑盒 t heat shock protein,HSP47 ELISA Kit 毛蕊異黃酮(標準品)  Calycosin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA檢測試劑盒Ratheatshockprotein60,hSP-60ELISAKit 96T/48T 毛蕊異黃酮 HPLC98% 20mg

大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)試劑盒 Rat heat shock protein 60,hSP-60 ELISA Kit 毛兩面針素 HPLC98% 20mg

大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA檢測試劑盒Ratheatshockprotein70,hSP-70ELISAKit 96T/48T 毛蘭素(標準品)  3'-Hydroxy-3,4,4',5-tetraMethoxybibenzyl  質(zhì)量規(guī)格:供含量測定用

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