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大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞【Rat Airway: Normal Bronchial and Tracheal Epithelial Cells】 產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞價格 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963866 |
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
PS人血漿抗凝蛋白S規(guī)格:48T/96T 美商陸酸 HPLC≥98% 20mg
PY兔交聯(lián)物規(guī)格:48T/96T 蒙花苷 HPLC≥97% 20mg
P人生長激素結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96T 迷迭香酸 HPLC≥98% 20mg
SAA人血清淀粉樣蛋白A規(guī)格:48T/96T 米力農(nóng) HPLC≥98% 20mg
SAP人血清淀粉樣蛋白P規(guī)格:48T/96T 米那普侖鹽酸鹽 HPLC≥98% 20mg
SA人唾液酸規(guī)格:48T/96T 米托拉酮 HPLC≥98% 20mg
schistosoma人血吸蟲規(guī)格:48T/96T 蜜二糖 HPLC≥98% 20mg
SLE人系統(tǒng)性紅斑狼瘡規(guī)格:48T/96T 綿馬貫眾素ABBA HPLC≥98% 10mg
Smad1人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子規(guī)格:48T/96T 綿馬酸ABA HPLC≥98% 10mg
Smad7人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7規(guī)格:48T/96T 棉酚 HPLC≥98% 20mg
小鼠絨毛膜促性腺激素(CG)ELISA試劑盒 ,英文名: CG ELISA Kit 米替福新(標(biāo)準(zhǔn)品) Miltefosine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA檢測試劑盒Mousesolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISAkit 96T/48T 1-PP1萘 1-Naphthyl PP1 質(zhì)量規(guī)格:99%,santa進(jìn)口原裝sc-203765
人干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)試劑盒 Human IRF3 ELISA Kit 阿利克侖半富馬酸鹽 Aliskiren hemifumarate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISAKit大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 埃博霉素 D Epothilone D 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR細(xì)胞培養(yǎng)級
C.parapsilosisRFLP基因分析試劑盒20 左亞葉酸鈣;甲酰四氫葉酸鈣 Calcium levofolinate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
MouseLeptospiraIgG,LepIgGELISA試劑盒小鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒96T96T 阿法替尼雙馬來酸鹽 Afatinib dimaleate /BIBW2992-MA2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
小鼠熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)ELISA試劑盒 ,英文名: HSF4 ELISA Kit 胞磷膽堿鈉;5-胞苷二單鈉鹽 Citicoline 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
豬瘦素(LEP)ELISA檢測試劑盒PorcineLeptin,LEPELISAKit 96T/48T 硬脂酸紅霉素 Erythromycin stearate 質(zhì)量規(guī)格:USP
大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2受體(TGF-β2R)試劑盒 Rat ansforming growth factor β2 receptor,TGF-β2R ELISA Kit 精胺 Spermine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
英文名稱HumanIerleukin-16ELISAKIT人白介素-16(IL-16)規(guī)格:96T/48T 亞精胺 Spermidine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,進(jìn)分
大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞價格大鼠清除受體富含半胱氨酸1型蛋白M130/CD163分子,CD163 試劑盒 Rat scavenger receptor cysteine-rich type 1 protein M130,CD163 ELISA kit 沒食子酸甲酯 HPLC≥98% 20mg
大鼠清淀粉樣蛋白P(SAP)試劑盒 Rat Serum amyloid P,SAP ELISA Kit 沒食子酸丙酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Propyl gallate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠趨化因子(FK)ELISA檢測試劑盒RatFractalkine,FKELISAKit 96T/48T 沒食子酸丙酯 HPLC≥99% 20mg
大鼠趨化因子(FK)試劑盒 Rat Fractalkine,FK ELISA Kit 沒食子酸丙酯 Propyl gallate 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%
大鼠趨化因子9(CXCL9)試劑盒 Rat C-X-C motif chemokine 9,CXCL9 ELISA kit 沒食子酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Gallic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠去甲(NA)ELISA檢測試劑盒ratNoradrenaline,NAELISAKit 96T/48T 沒食子酸 HPLC≥98% 20mg
大鼠去乙?;囸I激素(dGHRL)試劑盒 Rat deacylated appetite-regulating hormone,dGHRL ELISA kit 沒食子酸 HPLC≥98% 200mg
大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA檢測試劑盒RatiactParathormone,i-PTHELISAKit 96T/48T 沒食子酸 Gallic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)試劑盒 Rat iact Parathormone,i-PTH ELISA Kit 沒食子兒茶素沒食子酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品) GCG;(−)-Gallocatechin gallate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠缺血修飾白蛋白(IMA)試劑盒 Rat Ischemia Modified Albumin,IMA ELISA Kit 沒食子兒茶素沒食子酸酯 HPLC≥98% 20mg
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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