當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2大鼠肺泡上皮細(xì)胞直銷
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
大鼠肺泡上皮細(xì)胞【Rat Lung: Normal Alveolar Epithelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠肺泡上皮細(xì)胞直銷 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號(hào) | CS-963861 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-α大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 甲磺酸伊馬替尼(標(biāo)準(zhǔn)品) Imatinib Mesylate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISA試劑盒大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 咪喹莫特 Imiquimod 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Ratplateletfactor3,PF3大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 咪喹莫特(標(biāo)準(zhǔn)品) Imiquimod 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Ratplateletfactor3,PF3ELISA試劑盒大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 伊立替康 Irinotecan 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RatPlateletFactor4,PF-4大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 伊立替康(標(biāo)準(zhǔn)品) Irinotecan 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatPlateletFactor4,PF-4ELISA試劑盒大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸伊立替康,(CPT-11) Irinotecan HCl Trihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,三水合物
RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸伊立替康(標(biāo)準(zhǔn)品) Irinotecan HCl Trihydrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISA試劑盒大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硝酸異康唑 Isoconazole Nitrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
RatpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-A大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硝酸異康唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Isoconazole Nitrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISA試劑盒大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 異維A酸 Isotretinoin 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR
BrdU標(biāo)記法組織冰凍切片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 2-甲氧基雌二醇 2-Methoxyestradiol 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%,國產(chǎn)
MouseLactateDehydrogenase,LDHELISA試劑盒小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2-甲氧雌二醇(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Methoxyestradiol 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 ,英文名: PEDF ELISA Kit 鹽酸苯乙雙胍/降糖靈/鹽酸苯乙福明 Phenformin 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA檢測試劑盒Mousemaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAkit 96T/48T 鹽酸苯乙雙胍/降糖靈/鹽酸苯乙福明(標(biāo)準(zhǔn)品) Phenformin 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定
人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)試劑盒 Human SCF/MGF ELISA kit 頭孢哌酮鈉 Cefoperazone 質(zhì)量規(guī)格:870μg-1015μg /mg,USP,BR
RatInsulin,INSELISAKit大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 頭孢哌酮鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefoperazone 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定
BrdU標(biāo)記法組織石蠟切片細(xì)胞繁殖NBT顯色檢測試劑盒10/20 N-芐基甘氨酸 N-Benzylglycine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR
MouseLactoferrin,LTF/LFELISA試劑盒小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 扎那米韋 Zanamivir 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,一水物
小鼠狀腺原酸(T3)ELISA試劑盒 ,英文名: T3 ELISA Kit 扎那米韋(標(biāo)準(zhǔn)品) Zanamivir 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA檢測試劑盒Mousemonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAkit 96T/48T 去氧氟尿苷/5'-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷 Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
大鼠肺泡上皮細(xì)胞直銷大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA檢測試劑盒RatcoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit 96T/48T 美洲茶酸 HPLC≥98% 5mg
大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)試劑盒 Rat coagulation factor Ⅹ,FⅩ ELISA Kit 美雄諾龍(標(biāo)準(zhǔn)品) Mestanolone 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用
大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)試劑盒 Rat coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit 美西林/氮脒青霉素 Mecillinam 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)試劑盒 Rat coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA Kit 美托拉宗(標(biāo)準(zhǔn)品) Metolazone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠凝血因子IX(FIX)ELISA檢測試劑盒RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit 96T/48T 美托拉宗 Metolazone 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
大鼠凝血因子IX(FIX)試劑盒 Rat Fcoagulation factor Ⅸ,FⅨ ELISA Kit 美他環(huán)素,甲烯土霉素鹽酸鹽 Metacycline HCl;Methacycline HCl 質(zhì)量規(guī)格:potency>877U per mg
大鼠凝血因子XIV(FXIV/protein C)試劑盒 Rat Protein C/aoprothrombin IIA/coagulation factor XIV,PROC/FXIV ELISA Kit 美他環(huán)素,甲烯土霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) Metacycline HCl;Methacycline HCl 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISA檢測試劑盒RatCalfIestineAlkalinePhosphatase,CIAPELISAKit 96T/48T 美他多辛(標(biāo)準(zhǔn)品) Metadoxine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
大鼠牛血清白蛋白(BSA)抗體(IgG)試劑盒 Rat bovine serum albumin(BSA)aibody IgG ELISA kit 美索巴莫(標(biāo)準(zhǔn)品) Methocarbamol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA檢測試劑盒RatBladdeumoraigen,BTAELISAKit 96T/48T 美索巴莫 Methocarbamol 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP 32
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