當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2小鼠表皮黑色素細胞說明
細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
小鼠表皮黑色素細胞說明 | T25m2 | CS-963855 |
小鼠表皮黑色素細胞【Mouse Skin: Normal Melanocytes】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術(shù)指導,請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
人β2轉(zhuǎn)鐵蛋白(β2TF)試劑盒 Human beta 2 ansferrin,β2TF ELISA Kit 滅菌丹標準溶液(100μg/ml,u=2%) N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%
人β4整合素(ITG β4/CD104)試劑盒 Human ITG β4/CD104 ELISA Kit 滅菌丹標準溶液(10μg/ml,u=6%) N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%
人β氨基己糖苷酶A(β-Hex A)試劑盒 Human β-hexosaminidase A,β-Hex A ELISA Kit 惡草酮(分析標準品,97.5%) Oxadiazon 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,97.5%
人β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)ELISA檢測試劑盒Humanβ-hexosaminidaseA 96T/48T 嘧啶磷(10μg/ml,u=3%) Pirimiphos-methyl solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=3%
人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA檢測試劑盒Humanβ-galactosidase,βGAL 96T/48T 撲滅津(標準品) Propazine 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
人β半乳糖苷酶(βGAL)試劑盒 Human β-galactosidase,βGAL ELISA Kit 戊炔草胺(標準品) Propyzamide 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
人β-促脂素(β-LPH)ELISA檢測試劑盒Humanβ-lipoopichormone,β-LPH 96T/48T 腐霉利(標準品) Procymidon 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒 Human amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit 吡蚜酮(標準品) Pymetrozin 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒 Human amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit 96T 敵稗(分析標準品,98%) Propanil 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,98%
人β淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)試劑盒 Human amyloid beta peptide 25-35,Aβ25-35 ELISA Kit 抑霉唑標準溶液(10μg/ml,u=2%) Imazalil solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%
BRDU(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 氟達拉賓 Fludarabine 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR
MouseIerleukin9,IL-9ELISA試劑盒小鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氟達拉賓(標準品) Fludarabine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)ELISA試劑盒 ,英文名: NF-L ELISA Kit G-418 硫酸鹽 G-418 disulfate,Geneticin 質(zhì)量規(guī)格:>500U/mg,BR
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA檢測試劑盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAkit 96T/48T 埃羅替尼 Erlotinib 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,細胞培養(yǎng)級
人甘油二酯(DAG)試劑盒 Human diacylglycerol,DAG ELISA kit N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC) N-Acetyl-cysteine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RatImmunoglobulinG,IgGELISAKit大鼠球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 佐匹克隆 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BP2009,BR
BrdU標記法細胞繁殖比色法定量檢測試劑盒10/50 佐匹克隆(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 阿尼西坦,回拉西坦;茴拉西坦 Aniracetam 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR
小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒 ,英文名: NF ELISA Kit 阿尼西坦(標準品) Aniracetam 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
小鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA檢測試劑盒Mouseangiopoietieceptoie2,ANG-R-Tie2ELISAkit 96T/48T L-谷氨酰胺 L-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠表皮黑色素細胞說明大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒 Rat annexin Ⅴ,ANX-Ⅴ ELISA Kit 米托蒽醌 Mitoxantrone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,BR
大鼠膜聯(lián)蛋白I(ANX-I)試劑盒 Rat annexin I,ANX-I ELISA Kit 米吐爾(>98%,BC) Metol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
大鼠膜聯(lián)蛋白IV(ANX-IV)試劑盒 Rat annexin IV,ANX-IV ELISA Kit 米替福新(標準品) Miltefosine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥>98%,標準品
大鼠膜相關(guān)0脂酶A2(PLA2G2A)試劑盒 Rat Phospholipase A2, membrane associated,PLA2G2A ELISA kit 米替福新 Miltefosine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)試劑盒 Rat terminal compleme complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit 米屈肼(標準品) Mildronate,Meldonium 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠末端補體復合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA檢測試劑盒RatterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 96T/48T 米屈肼 Mildronate,Meldonium 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,二水合物
大鼠母親DPP同源物4(Smad 4)試劑盒 Rat mothers against decapeaplegic homolog 4,Smad4 ELISA Kit 米諾地爾葡萄糖苷酸 Minoxidil Glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)試劑盒 Rat brain-g peptides,BGP/Gehrelin Elisa kit 米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶(標準品) Minoxidil Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
大鼠腦啡肽(ENK)試劑盒 Rat enkephalin,ENK ELISA Kit 米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶 Minoxidil Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%
大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA檢測試劑盒RatNeuroglobin,NGBELISAKit 96T/48T 米諾地爾(標準品) Minoxidil 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
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