當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞直銷
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞直銷 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963853 |
小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞【Mouse Embryo: Normal Fetal Epidermal Keratinocytes】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
英文名稱RatTissuePolypeptideAigen大鼠組織多肽抗原(TPA)規(guī)格:96T/48T N,N-二乙酰 去-5'-氯-4-氟代芐基莫沙必利 N,N-Diacetyl Des-5'-chloro-4-fluorobenzyl Mosapride 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
英文名稱RatTissuePolypeptideAigen大鼠組織多肽抗原(TPA)規(guī)格:96T/48T 檸檬酸莫沙必利酰胺 Mosapride Citric Amide 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
英文名稱Rattotalhemolyticcompleme大鼠總?cè)苎a體(CH50)規(guī)格:96T/48T 去-4-氟代芐基莫沙必利 Des-4-fluorobenzyl Mosapride 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
英文名稱Rattotalhemolyticcompleme大鼠總?cè)苎a體(CH50)規(guī)格:96T/48T 莫沙必利 Mosapride 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
英文名稱Ratt-PA大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)規(guī)格:96T/48T 檸檬酸莫沙必利 Mosapride 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
英文名稱Ratt-PA大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)規(guī)格:96T/48T 莫沙必利N氧化物 Mosapride N-Oxide 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
英文名稱RatTpP大鼠血栓前體蛋白(TpP)。規(guī)格:96T/48T 檸檬酸莫沙必利二水合物 Mosapride dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
英文名稱RatTpP大鼠血栓前體蛋白(TpP)。規(guī)格:96T/48T 培哚普利 Perindopril 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
英文名稱RatTSH大鼠促甲狀腺素(TSH)規(guī)格:96T/48T 培哚普利?;?/span>-α-D-葡萄糖苷酸 Perindopril Acyl-α-D-glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
英文名稱RatTSH大鼠促甲狀腺素(TSH)規(guī)格:96T/48T 培哚普利?;?/span>-β-D-葡萄糖苷酸 Perindopril Acyl-β-D-glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人肝X受體α(LXRα)試劑盒 Human Liver X Receptor α,LXRα ELISA Kit 卡巴拉汀(標準品) Rivastigmine tartrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Rathydroxyproline,HypELISAKit大鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 咖啡酸 Caffeic acid 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR
Bradford大量蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒50 咖啡酸(標準品) Caffeic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品
MouseIerleukin5,IL-5ELISA試劑盒小鼠白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 咖啡酸(進口標準品) Caffeic acid 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%(T),進口標準品
小鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒 ,英文名: NSE ELISA Kit 硫酸新霉素 Neomycin sulfate 質(zhì)量規(guī)格:≥600 I.U. /mg,USP,BR
小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體1(AIL-R1)ELISA檢測試劑盒Mousetumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AILR1ELISAKit 96T/48T 硫酸新霉素(標準品) Neomycin sulfate 質(zhì)量規(guī)格:效價測定
人桿狀病毒IAP重復包含蛋白2/3(BIRC2/3)試劑盒 Human BIRC2/3 ELISA Kit 鹽酸苯海拉明 Diphenhydramine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Rathypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸苯海拉明(標準品) Diphenhydramine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒200 聚肌苷酸 Polyinosinic acid 質(zhì)量規(guī)格:≥90.0%,BR
MouseIerleukin6,IL-6ELISA試劑盒小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 米屈肼 Mildronate,Meldonium 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,二水合物
小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞直銷大鼠硫氧化還原蛋白(x)試劑盒 Rat Thioredoxin,x ELISA Kit 滅菌丹標準溶液(10μg/ml,u=6%) N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%
大鼠卵0脂膽?;D(zhuǎn)移酶(LCAT)試劑盒 Rat Lecithin Cholesterol Acylansferase,LCAT ELISA Kit 滅菌丹標準溶液(100μg/ml,u=2%) N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%
大鼠卵巢癌標志物CA125ELISA檢測試劑盒Ratovariancancermarker-CA125ELISAKit 96T/48T 滅草煙,咪唑煙酸 Imazapyr acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%
大鼠卵泡抑素(FS)ELISA檢測試劑盒RatFollistatin,FSELISAKit 96T/48T 滅草?。藴势罚?/span> Monuron 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
大鼠卵泡抑素(FS)試劑盒 Rat Follistatin,FS ELISA Kit 棉籽糖 HPLC≥98% 20mg
大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)試劑盒 Rat ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA Kit 棉隆(標準品) Dazomet 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,97%
大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA檢測試劑盒RatovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit 96T/48T 棉酚 HPLC≥98% 20mg
大鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)試劑盒 Rat ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA Kit 綿棗兒素 HPLC≥98% 5mg
大鼠絡氨酸酶(TYR)試劑盒 Rat Tyrosinase,TYR ELISA kit 綿馬酸ABA(標準品) Filixic acid ABA 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠酶(CA)ELISA檢測試劑盒Ratcarbonicanhydrase,CAELISAKit 96T/48T 綿馬酸ABA HPLC≥98% 10mg
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