當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2小鼠輸尿管上皮細(xì)胞說明
注意事項:
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠輸尿管上皮細(xì)胞說明 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963823 |
小鼠輸尿管上皮細(xì)胞【Mouse Ureter:Normal Ureter Epithelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠壞死因子樣細(xì)胞凋亡弱誘導(dǎo)因子(TWEAK)ELISA試劑盒 ,英文名: TWEAK ELISA Kit ?;悄懰徕c Taurocholic acid Salt 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 諾米林(標(biāo)準(zhǔn)品) Nomilin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)ELISA檢測試劑盒MouseCyclicguanosinemonophosphate,cGMP 96T/48T 歐當(dāng)歸內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品) Levistilide A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒 ,英文名: cGMP ELISA Kit 歐前胡素(標(biāo)準(zhǔn)品) Imperatorin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 ,英文名: cAMP ELISA Kit α-蒎烯 α-pinene 質(zhì)量規(guī)格:GC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 β-蒎烯(標(biāo)準(zhǔn)品) β-pinene 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA檢測試劑盒MouseCyclosporineA,CsA 96T/48T 七葉膽苷XVII(標(biāo)準(zhǔn)品) Gypenoside XVII 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒 ,英文名: CsA ELISA Kit 七葉皂苷鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Aescinate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠環(huán)胍酸肽(CCP)ELISA試劑盒 ,英文名: CCP ELISA Kit 漆黃素 Fisetin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,BR
小鼠環(huán)加氧酶1(PTGS1)ELISA試劑盒 ,英文名: PTGS1 ELISA Kit 漆黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Fisetin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Rat myosin (Myosin) ELISA Kit 大鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA試劑盒 利福昔明(標(biāo)準(zhǔn)品) Riimin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Humanneuraminidase,NAELISAKit 人神經(jīng)氨酸酶(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 鹽酸羅匹尼羅 Ropinirole HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%
Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2ELISA試劑盒鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸羅哌卡因 Ropivacaine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,一水合物
載玻片細(xì)胞樣品細(xì)胞色素C蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 鹽酸羅哌卡因(標(biāo)準(zhǔn)品) Ropivacaine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
Mousedopamine,DAELISAKit小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣 Rosuvastatin Calcium 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒 ,英文名: STK ELISA Kit 瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣(標(biāo)準(zhǔn)品) Rosuvastatin Calcium 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA檢測試劑盒MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAkit 96T/48T 西他列汀一水 Sitagliptin phosphate monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
人孤腓肽(OFQ/N)試劑盒 Human orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit 西他列汀一水(標(biāo)準(zhǔn)品) Sitagliptin phosphate monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 壯觀霉素,鹽酸大觀霉素 Spectinomycin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
ATP酶法冰凍切片人體肌肉組織分型染色試劑盒20 壯觀霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) Spectinomycin 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
小鼠輸尿管上皮細(xì)胞說明大鼠0酸化蛋白激酶B(P-PKB)試劑盒 Rat phosphorylated protein kinase B,p-PKB ELISA Kit 歐奕二烯酮 B HPLC≥98% 5mg
大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA檢測試劑盒RatphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 96T/48T 歐前胡素(標(biāo)準(zhǔn)品) Imperatorin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒 Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit 歐前胡素 HPLC≥98% 20mg
大鼠0酸化縫隙連接蛋白α1,43kDa(phosphorylated GJA1)試劑盒 Rat phosphorylated gap junction protein, alpha 1,43kDa(phosphorylated GJA1)ELISA kit 歐夾竹桃苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Oleandrin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠0酸化核因子-κB(p-NF-κB)試劑盒 Rat phosphor-nuclear factor kappa B,p-NF-κB ELISA Kit 歐夾竹桃苷 HPLC≥98% 5mg
大鼠0酸化糖原合成酶激酶3(pGSK-3)試劑盒 Rat phospho glycogen syhase kinase 3,pGSK-3 ELISA Kit 歐當(dāng)歸內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品) Levistilide A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒 Rat phospho-exacellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit 歐當(dāng)歸內(nèi)酯A HPLC≥98% 20mg
大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)試劑盒 Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,pAMPK ELISA kit 女貞苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Ligustroflavone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠0酸化胰島素受體(pISR1)試劑盒 Rat phosphorylated insulin receptor subsate 1,pISR1 ELISA kit 女貞苷 HPLC≥98% 20mg
大鼠0酸化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)試劑盒 Rat Phosphorylated acetyl-CoA catboxylase,pACCase ELISA Kit 女貞甙 HPLC≥98% 5mg
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