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上海莼試生物技術有限公司
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小鼠腎足突細胞操作

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產(chǎn)品型號T25m2

品       牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-20 14:17:53瀏覽次數(shù):111次

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小鼠腎足突細胞操作如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

小鼠腎足突細胞操作

T25m2

CS-963820

小鼠腎足突細胞【Mouse Kidney: Kidney Podocytes產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞處理:
1 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2  培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37,5%CO2  培養(yǎng)RatsolubleIerleukin6receptor,sIL-6R大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 培美曲塞二鈉  Pemetrexed Di  質量規(guī)格:>99%,BR,水合物

RatsolubleIerleukin6receptor,sIL-6RELISA試劑盒大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 培美曲塞二鈉(標準品)  Pemetrexed Di  質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

Ratsolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1大鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 酞磺胺噻唑  Phthalylsulfathiazole  質量規(guī)格:>95%

RatSolubleprotein-100,S-100大鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 匹格列酮  Pioglitazone base  質量規(guī)格:>99%

RatSolubleprotein-100B,S-100B大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 匹格列酮(標準品)  Pioglitazone base  質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

RatsolubleP-selectin,sP-selectin大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 匹格列酮鹽酸鹽  Pioglitazone HCl  質量規(guī)格:>98.5%

Ratsolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKL大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 匹格列酮鹽酸鹽(標準品)  Pioglitazone HCl  質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 苯噻啶蘋果酸鹽  Pizotifen Malate  質量規(guī)格:>98.5%,BR

RatsolubleToll-likereceptor6,sTLR-6大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硫酸多粘菌素B  Polymyxin B Sulfate  質量規(guī)格:>6500 IU/mg,USP30

Ratsolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAIL大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sAIL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硫酸多粘菌素B(標準品)  Polymyxin B Sulfate  質量規(guī)格:含量測定
豚鼠血清總補體(CH50)ELISA檢測試劑盒GuineaPig50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 96T/48T 褪黑素,松果體素(標準品)  Melatonine  質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

牛肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒 Bovine Creatine Kinase MB Isoenzyme,CK-MB ELISA Kit 鹽酸米諾環(huán)素(標準品)  Minocycline   質量規(guī)格:>98%,BR

英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein2ELISAKit人骨成型蛋白質2(BMP-2)規(guī)格:96T/48T 鹽酸米托蒽醌(進分)  Mitoxantrone HCl  質量規(guī)格:進分sigma M6545

動物細胞/組織細胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒10 鹽酸米托蒽醌  Mitoxantrone HCl  質量規(guī)格:>98%,USP,可用于細胞培養(yǎng)

Ratsolubleierleukin-1receptor,IL-1sRELISA試劑盒大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸米托蒽醌(標準品)  Mitoxantrone HCl  質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

小鼠死亡關聯(lián)蛋白激酶3(DAPK3)ELISA試劑盒 ,英文名: DAPK3 ELISA Kit 咪唑立賓  Mizoribine  質量規(guī)格:>98%,細胞培養(yǎng)級

豚鼠球蛋白G(IgG)ELISA檢測試劑盒GuineapigImmunoglobulinG,IgGELISAKit 96T/48T 莫吉司坦  Moguisteine  質量規(guī)格:>98%,BR

牛肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)試劑盒 Bovine Creatine Kinase BB Isoenzymes,CK-BB ELISA Kit 莫吉司坦(標準品)  Moguisteine  質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

英文名稱HumanOsteoprotegerinELISAKIT人骨保護素(OPG)規(guī)格:96T/48T 糠酸莫米松  Mometasone furoate  質量規(guī)格:>98%,USP31

動物細胞/組織細胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒10 糠酸莫米松(標準品)  Mometasone furoate  質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
小鼠腎足突細胞操作大量蛋白樣品樹脂法去內試劑盒5 派立辛 HPLC98% 20mg

大量蛋白樣品樹脂法去內試劑盒5 哌唑嗪-d8  Prazosin-d8  質量規(guī)格:美國進口

大量蛋白樣品液相法去內試劑盒5 哌唑嗪  Prazosin  質量規(guī)格:美國進口

大量蛋白樣品液相法去內試劑盒5 哌立福新(KRX-0401)  Perifosine  質量規(guī)格:>98%,蛋白激酶B(Akt)信號通路阻斷劑

大量藍藻菌基因組DNA氯化銫萃取試劑盒5 哌拉西林鈉(標準品)  Piperacillin    質量規(guī)格:含量測定

大量全血基因組DNA化試劑盒(20毫升全血)10 哌拉西林鈉  Piperacillin    質量規(guī)格:>900μg//mg,USP,BR

大量全血基因組DNA化試劑盒10 哌拉西林(標準品)  Piperacillin  質量規(guī)格:HPLC含量測定

大量微藻菌基因組DNA萃取試劑盒(高多糖/)5 哌拉西林  Piperacillin  質量規(guī)格:>95%,BR

大量腺病毒沉淀法化試劑盒1 帕唑帕尼鹽酸鹽  Pazopanib HCl  質量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

大量腺病毒氯化銫化試劑盒5 帕唑帕尼  Pazopanib  質量規(guī)格:>99%,BR
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。

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