當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2小鼠腎小管上皮細(xì)胞說明
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
小鼠腎小管上皮細(xì)胞說明 | T25m2 | CS-963819 |
小鼠腎小管上皮細(xì)胞【Mouse Tubular: Normal Tubular Epithelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
VD人維生素D規(guī)格:48T/96T 蟛蜞菊內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg
VE-cad人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體規(guī)格:48T/96T 霹靂蘿芙木堿 HPLC≥98% 10mg
VEGF-B人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B規(guī)格:48T/96T 平貝堿甲 HPLC≥98% 20mg
VEGF-C人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C規(guī)格:48T/96T 蘋果酸 HPLC≥98% 20mg
VEGF-D人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D規(guī)格:48T/96T 蒲公英賽醇 HPLC≥98% 20mg
VEGFR-1人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1規(guī)格:48T/96T 蒲公英甾醇 HPLC≥98% 20mg
VEGFR-2人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2規(guī)格:48T/96T 蒲公英甾醇乙酸酯 HPLC≥98% 10mg
VEGFR-3人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3規(guī)格:48T/96T 普拉洛芬 HPLC≥98% 20mg
VEGF人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子規(guī)格:48T/96T 七葉膽苷XVII HPLC≥98% 20mg
VE人維生素E規(guī)格:48T/96T 七葉樹皂苷B HPLC≥98% 20mg
英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein3ELISAKit人骨成型蛋白質(zhì)3(BMP-3)規(guī)格:96T/48T 鹽酸利多卡因(標(biāo)準(zhǔn)品) HCl 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
動物細(xì)胞/組織葡萄糖0酸變位酶(phosphoglucomase;PGM)電泳分析試劑盒5 賴諾普利 Lisinopril Dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,二水合物可用于細(xì)胞培養(yǎng)
RatsolubleIerleukin2recepter,IL-2sRELISA試劑盒大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 賴諾普利(標(biāo)準(zhǔn)品) Lisinopril Dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
小鼠松弛肽(RLN)ELISA試劑盒 ,英文名: RLN ELISA Kit 鹽酸洛貝林 Lobeline 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
豚鼠組胺(HIS)ELISA檢測試劑盒guineapigHistamine,HISELISAKit 96T/48T 氯尼達(dá)明 Lonidamine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
牛甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)試劑盒 Bovine Thyroxine-Binding Globulin,TBG ELISA Kit 洛匹那韋 Lopinavir 質(zhì)量規(guī)格:>99%
英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein2ELISAKit人骨成型蛋白質(zhì)-2(BMP-2)規(guī)格:96T/48T 洛匹那韋(標(biāo)準(zhǔn)品) Lopinavir 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
動物細(xì)胞/組織細(xì)胞色素C釋放比色法定量檢測試劑盒10 氯雷他定 Loratadine 質(zhì)量規(guī)格:>99%
RatsolubleIerleukin6receptor,sIL-6RELISA試劑盒大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氯雷他定(標(biāo)準(zhǔn)品) Loratadine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠四旋蛋白30(TSPAN30)ELISA試劑盒 ,英文名: TSPAN30 ELISA Kit 褪黑素,松果體素 Melatonine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠腎小管上皮細(xì)胞說明化線粒體腫脹流式細(xì)胞儀測定試劑盒20 泡桐素 HPLC≥98% 5mg
化線粒體總RNA萃取試劑盒20 滂胺天藍(lán)(~50%,BS) Chicago sky blue 6B 質(zhì)量規(guī)格:~50%,BS
化葉綠體DNA萃取試劑盒20 泮托拉唑鈉一水物 Pantoprazole 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
化葉綠體DNA萃取試劑盒20 泮托拉唑鈉1.5水合物(標(biāo)準(zhǔn)品) Pantoprazole Sesquihydrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒Monkeyfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 96T/48T 泮托拉唑鈉1.5水合物 Pantoprazole Sesquihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒20 泮托拉唑鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Pantoprazole 質(zhì)量規(guī)格:含量測定,一水物
大丁草(gerbera)增殖培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 攀登魚藤異黃酮 HPLC≥98% 5mg
大豆樣品處理試劑盒20 派洛寧Y(Ind Grade) Pyronin Y 質(zhì)量規(guī)格:Ind Grade
大量(文庫)酵母細(xì)胞*轉(zhuǎn)化試劑盒10 派洛寧B(Ind) Pyronin B 質(zhì)量規(guī)格:>30%,Ind Grade
大量Lipofusin脂質(zhì)體細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒10/100 派利文堿 HPLC≥98% 20mg
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
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