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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2成年小鼠心肌細(xì)胞說明
成年小鼠心肌細(xì)胞【Mouse Cardiac: Normal Myocardial Cells】 產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 成年小鼠心肌細(xì)胞說明 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號(hào) | CS-963815 |
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)試劑盒 Rat Clara cell protein,CC16 ELISA Kit 撲熱息痛/對(duì)乙酰氨基酚 Paracetamol(Acetaminofen polvo) 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
大鼠酪氨酸蛋白激酶JAK3(Jak3)試劑盒 Rat tyrosine-protein kinase JAK3,Jak3 ELISA kit 撲熱息痛(標(biāo)準(zhǔn)品) Paracetamol(Acetaminofen polvo) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠酪氨酸羥化酶(TH)試劑盒 Rat Tyrosine Hydroxylase,TH ELISA Kit 奧拉帕尼 Olaparib,AZD2281,KU0059436 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,選擇性的PARP1/2抑制劑
大鼠類風(fēng)濕因子(RF)試劑盒 Rat Rheumatoid Factor,RF ELISA Kit 奎尼丁 Quinidine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR
大鼠類5α還原酶1(SRD5A1)試劑盒 Rat Steroid 5-Alpha-Reductase 1,SRD5A1 ELISA Kit 單甘油酯/甘油一酯 Monolaurin/1-Lauroyl-rac-glycerol 質(zhì)量規(guī)格:單酯含量大于40%
大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSF 96T/48T 甘油單油酸酯/單油酸甘油酯 Monoolein 質(zhì)量規(guī)格:度≥50%,油狀液體
大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒 Rat Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit ADP.Na2; 5'-二腺苷二鈉/腺苷-5'-二二鈉鹽 Adenosine-5'-diphosphate di salt(ADPna) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%,BR
大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSF 96T/48T ADP; 5'-二腺苷/腺苷-5'-二 Adenosine 5'-(trihydrogen diphosphate)/ADP 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%,BR
大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)試劑盒 Rat Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit 沙格列汀/沙克列汀 Saxagliptin monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,單水合物
大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)試劑盒 Rat Leucine aminopepridase,LAP ELISA Kit 更昔洛韋 Ganciclovir 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
rabbitHistamine,HISELISA試劑盒兔子組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氫化奎寧定;雙氫奎尼丁 Hydroquinidine 質(zhì)量規(guī)格:>95%
小鼠酸脫氫酶E1(PDH E1) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 鹽酸依匹斯汀 Epinastine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Rat hydroxyproline (Hyp) ELISA Kit 大鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒 鹽酸依匹斯汀(標(biāo)準(zhǔn)品) Epinastine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit 人0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 依普利酮 Eplerenone 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
Humanbonemorphogeneticproteins,BMPsELISA試劑盒人骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 依普利酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Eplerenone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
植物組織DNA損傷彗星熒光檢測(cè)試劑盒20 度酸 Etodolac 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
Humanstaphylococcusaureuseerotoxins,SEELISAKit人金葡菌腸(SE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 度酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Etodolac 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠酸羧化酶(PC)ELISA試劑盒 ,英文名: PC ELISA Kit 孕烯 Etonogestrel 質(zhì)量規(guī)格:>98%
人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體(KLR)ELISA檢測(cè)試劑盒Humankillercelllectin-likereceptor,KLRELISAKit 96T/48T 依維莫司 Everolimus;RAD001 質(zhì)量規(guī)格:>95%,mTOR抑制劑,BR
大鼠可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(sEM-1)試劑盒 Rat soluble iggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,sEM-1 ELISA Kit 醋酸氟輕松;醋酸膚輕松 Fluocinolone Acetonide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
成年小鼠心肌細(xì)胞說明化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pCMV5-RUNX3)10微克 匹伐他汀鈣(標(biāo)準(zhǔn)品) Pitavastatin Calcium /NK-104 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0% ,標(biāo)準(zhǔn)品
化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pCMV5-RUNX3)測(cè)序引物對(duì)2OD 匹伐他汀鈣 Pitavastatin Calcium /NK-104 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0% 相關(guān)物質(zhì)及對(duì)應(yīng)異構(gòu)體均小于1%
化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pGEFP-RUNX3)10微克 匹多莫德(標(biāo)準(zhǔn)品) Pidotimod 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pGEFP-RUNX3)測(cè)序引物對(duì)2OD 匹多莫德 Pidotimod 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
化溶酶體功能中性紅檢測(cè)試劑盒20 啤酒甾醇 HPLC≥98% 5mg
化微粒體0脂酶D(PhospholipaseD)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20 鈹試劑Ⅱ Beryllon II 質(zhì)量規(guī)格:AR
化微粒體0脂酶D(PhospholipaseD)總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20 芘(標(biāo)準(zhǔn)品) Pyrene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
化微粒體0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20 皮質(zhì)甾酮/腎上腺酮 Corticosterone 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%
化微粒體0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20 皮質(zhì)甾酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Corticosterone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
化微粒體0脂酶D2(PhospholipaseD2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20 皮脂酸 HPLC≥98% 5mg
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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