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小鼠主動脈平滑肌細胞【Mouse Aorta: Normal Aortic Smooth Muscle Cells】 產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠主動脈平滑肌細胞價格 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963806 |
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
pZERO載體克隆鑒定試劑盒20 千金藤堿 HPLC≥98% 5mg
pZERO載體克隆試劑盒(包括內(nèi)切酶)10 千里光非靈 HPLC≥98% 5mg
pZERO載體克隆試劑盒(不包括內(nèi)切酶)10 千年健醇 A HPLC≥98% 5mg
QuikFusin非脂質(zhì)體細胞轉(zhuǎn)染試劑盒10/100 前五味子素 B HPLC≥98% 5mg
Rabbit50%complemehemolysis,CH50ELISA試劑盒兔血清總補體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 前異菖蒲烯二醇 HPLC≥98% 5mg
Rabbit6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISA試劑盒兔6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 薔薇酸,'野鴉椿酸 HPLC≥98% 5mg
Rabbit8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISA試劑盒兔8-異構(gòu)前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基大黃素 HPLC≥98% 5mg
Rabbitacetylcholine,ACHELISA試劑盒兔乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 秦艽甲素 HPLC≥98% 5mg
Rabbitacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA試劑盒兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 秦皮素啶 HPLC≥98% 5mg
rabbitadiponectin,ADPELISA試劑盒兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 球花苦苷 HPLC≥98% 5mg
MouseEndotheliallipase,ELELISAKit小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸阿莫羅芬/鹽酸阿莫洛芬 Amorolfine 質(zhì)量規(guī)格:≥99,BR
小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: MPO-ANCA IgG ELISA Kit 鹽酸阿莫羅芬/鹽酸阿莫洛芬 (標準品) Amorolfine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
小鼠骨保護素(OPG)ELISA檢測試劑盒MouseOsteoprotegerin,OPGELISAKIT 96T/48T 氨芐西林鈉/氨芐青霉素鈉 Ampicillin 質(zhì)量規(guī)格:>900μg/mg, USP,BR
人谷氨酸脫羧酶65(GAD65)抗體(IgG)試劑盒 Human GAD65 aibody IgG ELISA Kit 氨芐西林鈉(標準品) Ampicillin 質(zhì)量規(guī)格:標準品用于含量測定
Ratglucocoicoidreceptor-α,GR-αELISAKit大鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 扁桃苷/苦杏仁苷 Amygdalin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
AP底物pNPP緩沖溶液100毫升 扁桃苷/苦杏仁苷(標準品) Amygdalin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
MousehepatitisBviruseaigen,HBeAgELISA試劑盒小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 阿尼芬凈 Anidulafungin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體(MPO-ANCA)ELISA試劑盒 ,英文名: MPO-ANCA ELISA Kit 安絲菌素P-3(束絲放線菌) Ansamitocin P-3 質(zhì)量規(guī)格:總含量>95% ,進分
小鼠B因子(BF)ELISA檢測試劑盒MousefactorB,BFELISAKit 96T/48T 阿瑞吡坦;阿瑞匹坦 Aprepitant 質(zhì)量規(guī)格:>98%;NK1受體拮抗劑
人谷氨酸脫羧酶65(GAD65)試劑盒 Human glamic acid decarboxylase 65,GAD65 ELISA Kit 泰諾福韋;替諾福韋 Tenofovir 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠主動脈平滑肌細胞價格冰凍切片組織RHO蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七葉膽皂甙 HPLC≥98% 20mg
冰凍切片組織RUNX3蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七葉膽苷XVII(標準品) Gypenoside XVII 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
冰凍切片組織RyR受體蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七葉膽苷XVII HPLC≥98% 20mg
冰凍切片組織TNFALPHA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七氟烷(標準品) Sevoflurane 質(zhì)量規(guī)格:供GC法檢查用
冰凍切片組織TNFBETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 鐠標準溶液(1000μg/ml) Praseodymium standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml
冰凍切片組織TSH-BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 鐠標準溶液(1000µg/mL,基體:10%HCl) Praseodymium standard 質(zhì)量規(guī)格:1000µg/mL,基體:10%HCl
冰凍切片組織TUBULIN蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 普瑞巴林(標準品) Pregabalin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
冰凍切片組織VEGF蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 普瑞巴林 Pregabalin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,S構(gòu)型
冰凍切片組織αSMA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 普羅雌烯 Promestriene 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR
冰凍切片組織βAMYLOID蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 普羅布考(標準品) Probucol 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。