我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種，細胞庫管理規(guī)范，提供的細胞株背景清楚，提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

小鼠腸微血管內(nèi)皮細胞【Mouse Intestinal: Normal Intestinal Microvascular Endothelial Cells】產(chǎn)品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法：
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度，細胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術(shù)指導，請及時電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細胞
客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細胞，當細胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細胞
1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)牛生長抑素(SS)試劑盒 Bovine Somatostatin,SS ELISA Kit 銦標準溶液（100mg/L(20℃)，基體：1％HCl）  Indium standard  質(zhì)量規(guī)格：100mg/L(20℃)，基體：1％HCl

牛瘦素(LEP)試劑盒 Bovine Leptin,LEP ELISA Kit 鉛標準溶液(100µg/mL,,基體:1%HNO3)  Lead standard  質(zhì)量規(guī)格：100µg/mL,,基體:1%HNO3

牛雙氫(DHT)試劑盒 Bovine Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit 镥標準溶液(1000μg/ml in 10%HCl)  Lutetium standard  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml in 10%HCl

牛羧化不全骨鈣素(ucOC)試劑盒 Bovine undercarboxylated osteocalcin,ucOC ELISA kit 鉬標準溶液(1000μg/ml)  Molybdenum standard  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml

牛胎盤生長因子(PGF)試劑盒 Bovine Placea growth factor,PGF ELISA kit 鉬標準溶液(100µg/mL,基體: 1%HCl)  Molybdenum standard  質(zhì)量規(guī)格：100µg/mL,基體: 1%HCl

牛特異性蛋白B(PSPB)試劑盒 Bovine Pregnancy Specific Protein B,PSPB ELISA Kit 水質(zhì)鎳標樣(濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標準品)  Nickel standard  質(zhì)量規(guī)格：濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標準品

牛甜菜堿-同型半胱氨酸S-轉(zhuǎn)移酶1(BHMT)試劑盒 Bovine Betaine--homocysteine S-methylansferase 1,BHMT ELISA kit 鈮標準溶液(1000μg/ml)  Niobium standard  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml

牛銅藍蛋白(CP)ELISA檢測試劑盒BovineCeruloplasmin,CP 96T/48T 鎳標準溶液(100μg/mL，基體:1%HNO3)  Nickel Standard  質(zhì)量規(guī)格：100μg/mL，基體:1%HNO3

牛銅藍蛋白(CP)試劑盒 Bovine Ceruloplasmin,CP ELISA Kit 鉀標準溶液(500mg/L,溶劑：水)  Potassium standard  質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：水

牛銅鋅-過氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)試劑盒 Bovine Cu/Zn-Superoxide Dismase,Cu/Zn-SOD ELISA Kit 鉀標準溶液(1000µg/mL,基體:1%HCl)   Potassium Solution  質(zhì)量規(guī)格：1000µg/mL,基體:1%HCl
小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA檢測試劑盒MouseNeuroophin4,-4ELISAKIT 96T/48T PS48  PS 48  質(zhì)量規(guī)格：>99%,PDK1 activator

人谷氨酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)試劑盒 human glamic acid decarboxylase aoaibody IgG,GAD-Ab-IgG ELISA Kit 硫鋅酸  Alphalipoic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%

Ratglucocoicoidreceptor,GRELISAKit大鼠糖皮質(zhì)類受體(GR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 硫辛酸（標準品）  Alphalipoic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

AP標記抗體穩(wěn)定/稀釋溶液10毫升 鹽酸氨索  Ambroxol HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

MousehepatitisBviruseaibody,HBeAbELISA試劑盒小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 鹽酸氨索(標準品)  Ambroxol HCl  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 氨磷?。ㄈ?/span>  Amifostine  質(zhì)量規(guī)格：干品Purity≥98.0%

Rat oponin I (Tn- I) ELISA Kit 大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 桿菌肽  Bacitracin  質(zhì)量規(guī)格：>65IU/MG,BR

HumanPhospholipaseC,PLCELISAKit 人0酯酶C(PLC)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 鹽酸阿米替林  Amitriptyline HCl   質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP31

DeerSerumamyloidA,SAAELISA試劑盒鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 苯磺酸氨氯地平（絡(luò)活喜、安洛地）  Amlodipine Besylate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP 6.4,BR

載玻片細胞線粒體復合物II蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 苯磺酸氨氯地平（標準品）  Amlodipine Besylate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
小鼠腸微血管內(nèi)皮細胞直銷冰凍切片組織P35蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七葉皂苷鈉 Purity≥98% 20mg

冰凍切片組織P38蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七葉皂苷IIb HPLC≥98% 10mg

冰凍切片組織PAR-1蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七葉皂苷Iia HPLC≥98% 10mg

冰凍切片組織PAR-2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七葉皂苷D HPLC≥95% 10mg

冰凍切片組織PAR-3蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七葉皂苷C HPLC≥95% 10mg

冰凍切片組織PARP蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七葉皂苷B HPLC≥98% 10mg

冰凍切片組織PDGF-A蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七葉皂苷A HPLC≥98% 10mg

冰凍切片組織PDGF-B蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七葉皂苷 Purity≥98% 20mg

冰凍切片組織PI-3KINASEP110BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七葉樹皂苷B HPLC≥98% 20mg

冰凍切片組織PP2A蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 七葉苷 HPLC≥98% 20mg
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。