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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2小鼠肺泡上皮細(xì)胞操作

小鼠肺泡上皮細(xì)胞操作

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)T25m2

品       牌

廠(chǎng)商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-06-19 20:14:22瀏覽次數(shù):109次

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小鼠肺泡上皮細(xì)胞操作如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

貨號(hào)

小鼠肺泡上皮細(xì)胞操作

T25m2

CS-963784

小鼠肺泡上皮細(xì)胞【Mouse Lung: Normal Alveolar Epithelial Cells產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理:
1 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書(shū)僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)電話(huà)或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶(hù)接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀(guān)察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2  培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀(guān)察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37,5%CO2  培養(yǎng)人層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)試劑盒 Human LAMC2 ELISA Kit 癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷  Decyl β-D-glucopyranoside   質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

人腸道病毒71(EV71)抗體(IgM)試劑盒 Human eerovirus 71 virus(EV71)aibody(gM)ELISA kit 德羅特韋(GSK-1349572,DTG)  Dolutegravir,GSK1349572  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

人腸三葉因子(ITF)試劑盒 Human Iestinal efoil factor,ITF ELISA Kit 十二烷基吡喃葡萄糖苷;月桂?;咸烟?/span>  Dodecyl glucopyranoside  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒 Human iFABP ELISA Kit 纖維素(20000~30000 mpa.s)  Hydroxyethyl Cellulose  質(zhì)量規(guī)格:粘度20000~30000 mpa.s

人超0酸化微管相關(guān)蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)試劑盒 Human hyper phosphorylated MAPT ELISA kit 纖維素(5500-6500 mpa.s)  Hydroxyethyl Cellulose  質(zhì)量規(guī)格:粘度5500-6500 mpa.s

人超抗原(Sag)ELISA檢測(cè)試劑盒Humansupperaigen,Sag 96T/48T纖維素(40~60 mpa.s)  Hydroxyethyl Cellulose  質(zhì)量規(guī)格:粘度40~60 mpa.s

人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒 Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)  Isopropyl β-D-thiogalactoside  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)試劑盒 Human Ula Sensitive Prostate Specific Aigen,PSA U S ELISA Kit 甘露糖;D-甘露糖  D-Mannose  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

人超敏熱休克蛋白60(HSP-60)試劑盒 Human Ula Sensitive Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit D-甘露糖(標(biāo)準(zhǔn)品)  D-Mannose  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人超敏熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒 Human Ula Sensitive Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit N-辛酰基-N-葡糖胺(MEGA-8)  N-Octanoyl-N-methylglucamine  質(zhì)量規(guī)格:≥97% ,進(jìn)分
豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVAsIgG)ELISA檢測(cè)試劑盒GuineapigovalbuminspecificIgG,OVAsIgGELISAKit 96T/48T 鹽酸噻加賓   Tiagabine HCl  質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR

牛球蛋白E(IgE)試劑盒 Bovine IgE ELISA Kit   Tigecycline  質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%

英文名稱(chēng)HumanCyclosporinAELISAKit人環(huán)胞霉素A(CSA)ELISAKit規(guī)格:96T/48T (標(biāo)準(zhǔn)品)  Tigecycline  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

動(dòng)物組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 替米考星  Tilmicosin  質(zhì)量規(guī)格:干品度≥90.0%,干品含量≥85.0%,USP34

RaeninELISA試劑盒大鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 替米考星(標(biāo)準(zhǔn)品)  Tilmicosin  質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定

小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒 ,英文名: GR-α ELISA Kit 馬來(lái)酸噻嗎洛爾  Timolol Maleate  質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP

小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseLaminin,LNELISAkit 96T/48T 馬來(lái)酸噻嗎洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)  Timolol Maleate  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)試劑盒 Human Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit 替硝唑  Tinidazole  質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP32

ratfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 替硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)  Tinidazole  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

ACTIN(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升 妥布霉素  Tobramycin Base  質(zhì)量規(guī)格:≥900μg/mg,USP33,BR
小鼠肺泡上皮細(xì)胞操作RatVitaminE,VEELISA試劑盒大鼠維生素E(VE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芹糖異甘草苷;異甘草苷芹糖  Isoliquiritin apioside  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

RatVitaminK1,VK1ELISAKit大鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芹糖異甘草苷 HPLC98% 10mg

RatVitaminK1,VK1ELISA試劑盒大鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芹糖甘草苷;甘草苷元-7-O-D-芹糖-4-O-D-葡萄糖苷  Liquiritin apioside  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

RatvonWillebrandFactor,vWFELISAKit大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芹菜素O葡萄糖醛酸苷'乙酯 HPLC98% 10mg

RatvonWillebrandFactor,vWFELISA試劑盒大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芹菜素O葡萄糖醛酸苷 HPLC98% 10mg

RatvonWillebrandFactorcleavingprotease,ADAMTS-13/vWF-cpELISAKit大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芹菜素OβD吡喃葡萄糖苷 HPLC98% 5mg

RatvonWillebrandFactorcleavingprotease,ADAMTS-13/vWF-cpELISA試劑盒大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芹菜素C葡萄糖C木糖苷 HPLC98% 20mg

RatypsinELISAKit大鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芹菜素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Apigenin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Ratypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芹菜素(G鼠李糖)龍膽糖苷 HPLC98% 20mg

Ratα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芹菜素 HPLC98% 20mg
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。

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