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細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
人腦膜成纖維細胞直銷 | T25m2 | CS-963765 |
人腦膜成纖維細胞【Human Brain: Normal Brain Meningeal Fibroblasts】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
MouseDehydroepiandrosterone,DHEAELISA試劑盒小鼠脫氫表雄同(DHEA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基苯乙酮 HPLC≥98% 20mg
MouseDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISA試劑盒小鼠脫氫表雄同S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去甲氧基表鬼臼 HPLC≥98% 20mg
MouseDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA試劑盒小鼠脫氫表雄同酯(DHEA-S)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ,二呫噸酮乙酸 HPLC≥98% 20mg
Mousedeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ,二羥基色原酮 HPLC≥98% 20mg
Mousediamineoxidase,DAO小鼠氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T O維斯阿米醇苷 HPLC≥98% 20mg
Mousediamineoxidase,DAOELISA試劑盒小鼠氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肌苷一二鈉鹽 HPLC≥98% 20mg
MousedipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISA試劑盒小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 甲氧基異黃酮 HPLC≥98% 20mg
MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDH小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 胞嘧啶 HPLC≥98% 50mg
MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISA試劑盒小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鳥苷一二鈉鹽 HPLC≥98% 20mg
Mousedopamine,DA小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基,二甲氧基黃酮 HPLC≥98% 10mg
英文名稱HumanMaixmetalloproteinase-3—MMP-3ELISAkit人基質金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISAkit規(guī)格:96T/48T 醋酸胰高血糖素 Glucagon Acetate 質量規(guī)格:purity>97%,BR
動物前列腺組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 醋酸戈那瑞林 Gonadorelin Acetate 質量規(guī)格:>98%,單醋酸鹽
RatProstaglandinE2,PG-E2ELISA試劑盒大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸格拉司瓊 Granisetron HCl 質量規(guī)格:>99.0%,BR
小鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA試劑盒 ,英文名: Hcy ELISA Kit 鹽酸格拉司瓊(標準品) Granisetron HCl 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
小鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA檢測試劑盒MouseIerleukin12,IL-12/P70ELISAKIT 96T/48T 氫氯噻嗪 Hydrochlorothiazide 質量規(guī)格:度>99%,AR
人胍基丁胺脲水解酶/凝集酶(AGMAT)試劑盒 Human AGMAT ELISA Kit 氫氯噻嗪(標準品) Hydrochlorothiazide 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
RatfactorB,BFELISAKit大鼠B因子(BF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 醋酸 Hydrocortisone Acetate 質量規(guī)格:>98.5%,BR
6倍聚蔗糖DNA電泳上樣緩沖液20毫升 醋酸(標準品) Hydrocortisone Acetate 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
MouseGelsolinELISA試劑盒小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸伊達比星 IdarubicinHCl 質量規(guī)格:含量960~1030µg/mg,USP30
小鼠同型半胱酸(HA)ELISA試劑盒 ,英文名: HA ELISA Kit 甲磺酸伊馬替尼 Imatinib Mesylate 質量規(guī)格:>99.0%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
人腦膜成纖維細胞直銷RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit 大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 去氧膽酸 Deoxycholic acid 質量規(guī)格:>95.0%
RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去氧穿心蓮內酯 HPLC≥98% 5mg
RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISA試劑盒大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去氧,二去氫穿心蓮內酯 HPLC≥98% 5mg
Ratplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit大鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去亞小檗堿(標準品) Demethyleneberberine 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Ratplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISA試劑盒大鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去亞小檗堿 HPLC≥98% 10mg
RatPlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAKit大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去噻唑基甲氧基碳酰 利托那韋 Desthiazolylmethyloxycarbonyl Ritonavir 質量規(guī)格:美國進口
RatPlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISA試劑盒大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去噻唑基 利托那韋 Desthiazolylmethyl Ritonavir 質量規(guī)格:美國進口
Ratplatelet-derivedgrowthfactor-BB,PDGF-BBELISAKit大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去氫紫堇堿 HPLC≥98% 20mg
Ratplatelet-derivedgrowthfactor-BB,PDGF-BBELISA試劑盒大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去氫魚藤素 HPLC≥98% 5mg
RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAKit大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去氫延胡索甲素硝酸鹽 HPLC≥96% 20mg
我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
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