當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2人胚胎絨毛膜細(xì)胞說明
人胚胎絨毛膜細(xì)胞【Human Embryo : Normal Embryonic Chorion Cells】 產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 人胚胎絨毛膜細(xì)胞說明 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號(hào) | CS-963751 |
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdT人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 日蟾毒它靈 HPLC≥98% 20mg
Humaestoteronerecepter,人睪同受體()ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 日當(dāng)藥黃素 HPLC≥98% 20mg
HumaetanusAibody人破傷風(fēng)抗體(TetanusAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鞣花酸 HPLC≥98% 20mg
Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRB 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 肉蓯蓉苷A HPLC≥98% 20mg
Humaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9 人視黃酸誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 肉豆寇酸單甘油酯 HPLC≥98% 20mg
Humaetinolbindingprotein,RBP 人視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 肉豆蔻醚 HPLC≥98% 20mg
Huma-Hglycoprotein,THP人TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肉豆蔻木脂素 HPLC≥98% 20mg
Humahioredoxieductase,xR人硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肉豆蔻酸 HPLC≥98% 20mg
Humahioredoxin,x人硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肉豆蔻酸甘油三酯 HPLC≥98% 20mg
Humahrombieceptor, 人凝血酶受體()ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 肉桂醇 HPLC≥98% 20mg
豬載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測試劑盒PorcineapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 96T/48T 巴氯芬 Baclofen 質(zhì)量規(guī)格:度>99,USP
大鼠特異生長因子(TSGF)試劑盒 Rat Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor,TSGF ELISA Kit 巴氯芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Baclofen 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
英文名稱HumanGamma-aminobyricacidELISAKit人γ氨基(GABA)規(guī)格:96T/48T 巴洛沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) Balofloxacin Dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:> 98%,水合物標(biāo)準(zhǔn)品
動(dòng)物組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)活性比色法定量檢測試劑盒20 巴洛沙星 Balofloxacin Dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:度> 98.5%,BR,二水合物
Ratα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISA試劑盒大鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸苯達(dá)莫司汀 Bendamustine HCl 質(zhì)量規(guī)格:度> 98%
小鼠脫氫酶1家族成員A1(ALDH1A1)ELISA試劑盒 ,英文名: ALDH1A1 ELISA Kit 鹽酸苯達(dá)莫司汀(標(biāo)準(zhǔn)品) Bendamustine HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
豬載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA檢測試劑盒PorcineapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T 倍他米松 Betamethasone 質(zhì)量規(guī)格:>98%
大鼠壞死因子誘導(dǎo)蛋白6(TSG-6)試劑盒 Rat tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein,TSG-6 elisa kit 倍他米松(標(biāo)準(zhǔn)品) Betamethasone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98% ,標(biāo)準(zhǔn)品
英文名稱Humanβ-ThromboglobulinELISAKit人β血小板球蛋白(β-TG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 比阿培南 Biapenem 質(zhì)量規(guī)格:度>97%
動(dòng)物組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)活性比色法定量檢測試劑盒20 比阿培南(標(biāo)準(zhǔn)品) Biapenem 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人胚胎絨毛膜細(xì)胞說明Ratmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISA試劑盒大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鞣花酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Ellagic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Ratmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAKit大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鞣花酸 HPLC≥98% 20mg
Ratmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISA試劑盒大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 溶葡球菌酶,溶葡萄球菌酶 Lysostaphin 質(zhì)量規(guī)格:BR,5000U/Pack
RatMothersagainstdecapeaplegichomolog1,Smad1ELISAKit大鼠Smad1ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 溶菌酶(蛋清) Lysozyme,from egg white 質(zhì)量規(guī)格:2萬U/mg,分子生物學(xué)級
RatMothersagainstdecapeaplegichomolog1,Smad1ELISA試劑盒大鼠Smad1ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 溶劑綠 7(>85.0%(E)) Pyranin 質(zhì)量規(guī)格:>85.0%(E)
RatMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISAKit大鼠Smad7ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 溶劑紅 48(>98.0%(HPLC)(T)) 2',4',5',7'-Tetrabromo-3,4,5,6-tetrachlorofluorescein 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
RatMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISA試劑盒大鼠Smad7ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 日落黃 Sunset Yellow FCF 質(zhì)量規(guī)格:BS
RatMotilin,MTLELISAKit大鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 日當(dāng)藥黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Swertiajaponin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatMotilin,MTLELISA試劑盒大鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 日當(dāng)藥黃素 HPLC≥98% 20mg
RatMullerianInhibitingSubstance/Ai-Mullerianhormone,MIS/AMHELISAKit大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 日蟾毒它靈 HPLC≥98% 20mg
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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