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我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
人胚胎滋養(yǎng)層細胞價格 | T25m2 | CS-963750 |
人胚胎滋養(yǎng)層細胞【Human Placental:Normal Placenta Trophoblast Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)人抗Smith抗體(Sm)試劑盒 Human ai-Smith aibody ELISA Kit 橙黃G;酸性橙10 Orange G 質(zhì)量規(guī)格:BS
人抗sp100抗體(sp100)試劑盒 Human ai-sp100-aibody ELISA Kit 橙黃Ⅱ OrangeⅡ 質(zhì)量規(guī)格:AR
人抗SSA/Ro抗體 試劑盒 Human ai-SSA/Ro aibody ELISA Kit 柯衣定 Chrysoidin 質(zhì)量規(guī)格:AR
人抗SS-A/Ro抗體試劑盒 Human SS-A/Ro aibody ELISA kit 日落黃 Sunset Yellow FCF 質(zhì)量規(guī)格:BS
人抗SSB/La抗體試劑盒 Human ai-SSB/La aibody ELISA Kit 酒石黃;檸檬黃;酸性黃 23 Tartrazine 質(zhì)量規(guī)格:BS
人抗SS-B/La抗體試劑盒 Human SS-B/La Aibody,ELISA Kit 酸性黃17 Acid Yellow 17 質(zhì)量規(guī)格:AR
人抗TNF-α自身抗體試劑盒 Human ai-TNF-alpha aoaibody ELISA kit 5-TAMRA;5-羧基四羅丹明琥珀脂 5-TAMRA, SE 質(zhì)量規(guī)格:>90%
人抗U1小核核糖核蛋白70kDa(SNP70)抗體試劑盒 Human ai U1 small nuclear ribonucleoprotein 70kDa(SNP70)aibody ELISA kit 吉拉爾特試劑T Girard’s reagent T 質(zhì)量規(guī)格:0.98
人抗UACA抗體(IgG)試劑盒 Human ai-UACA aibody IgG ELISA Kit 鉭試劑 N-Benzoyl-N-phenylhydroxylamine 質(zhì)量規(guī)格:AR
人抗α-胞襯蛋白抗體(IgG)試劑盒 Human ai-alpha-Fodrin aibody IgG ELISA Kit 左西孟旦 Levosimendan 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
RatEpithelial-Cadherin,E-CadELISAKit大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 5-氮胞苷/阿扎胞苷/5-氮雜胞嘧啶核苷 Azacitidine (5-Azacytidine) 質(zhì)量規(guī)格:度> 98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
5-OHp高效液相色譜電化學(xué)定量檢測試劑盒20 5-氮胞苷/阿扎胞苷(標準品) Azacitidine (5-Azacytidine) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
MouseFollistatin,FSELISA試劑盒小鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸氮卓斯汀 Azelastine HCl 質(zhì)量規(guī)格:度>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
小鼠脫氧酚(DPD)ELISA試劑盒 ,英文名: DPD ELISA Kit 鹽酸氮卓斯?。藴势罚?/span> Azelastine HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
兔血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA檢測試劑盒RabbitangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 96T/48T 阿奇霉素 Azithromycin 質(zhì)量規(guī)格:945-1030 ug /mg,二水物
牛溶菌酶(LZM)試劑盒 Bovine Lysozyme,LZM ELISA Kit 阿奇霉素(標準品) Azithromycin 質(zhì)量規(guī)格:效價測定
英文名稱Humaissueinhibitorofmaixmetalloproteinase-3,TIMP-3ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)規(guī)格:96T/48T 氨曲南 Aztreonam 質(zhì)量規(guī)格:> 95%,BR
動物肌肉組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 氨曲南(標準品) Aztreonam 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標準品
RatprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISA試劑盒大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 巴卡丁 III Baccatin III 質(zhì)量規(guī)格:度> 98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
小鼠脫氫酶9家族成員A1(ALDH9A1)ELISA試劑盒 ,英文名: ALDH9A1 ELISA Kit 巴卡丁 III(標準品) Baccatin III 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
人胚胎滋養(yǎng)層細胞價格RatMetallothionein,MTELISA試劑盒大鼠金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肉豆蔻酸,十四烷酸(標準品) Myristic acid 質(zhì)量規(guī)格:GC≥98%,標準品
RatMethemoglobin,MHBELISAKit大鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肉豆蔻酸,十四烷酸 Myristic acid 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
RatMethemoglobin,MHBELISA試劑盒大鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肉豆蔻酸 HPLC≥98% 20mg
RatMethylaseELISAKit大鼠化酶(Methylase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肉豆蔻木脂素(標準品) Myrislignan 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
RatMethylaseELISA試劑盒大鼠化酶(Methylase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肉豆蔻木脂素 HPLC≥98% 20mg
Ratmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAKit大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肉豆蔻醚(標準品) Myristicin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品
Ratmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISA試劑盒大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肉豆蔻醚 HPLC≥98% 20mg
Ratmonocytechemotacticprotein2,MCP-2ELISAKit大鼠單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肉豆寇酸單甘油酯 HPLC≥98% 20mg
Ratmonocytechemotacticprotein2,MCP-2ELISA試劑盒大鼠單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肉蓯蓉苷A(標準品) Cistanoside A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Ratmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAKit大鼠單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肉蓯蓉苷A HPLC≥98% 20mg
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
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