當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2人臍動脈平滑肌細(xì)胞說明
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
人臍動脈平滑肌細(xì)胞說明 | T25m2 | CS-963735 |
人臍動脈平滑肌細(xì)胞【Human Umbilical Cord:Normal Umbilical Cord Aortic Smooth Muscle Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)大鼠胰蛋白酶(ypsin)試劑盒 Rat ypsin ELISA Kit 玉米黃質(zhì) Zeaxanthin 質(zhì)量規(guī)格:>40%
大鼠胰蛋白酶原-1 試劑盒 Rat ypsinogen 1 ELISA Kit 三亞乙基硫代磷酰胺 Triethylenethiophosphoramide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA檢測試劑盒Ratypsinogenactivationpeptide,TAP 96T/48T 普拉克索堿 Pramipexole Base 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%
大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)試劑盒 Rat ypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit 普拉克索堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Pramipexole Base 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠胰蛋白酶原酶(y)試劑盒 Rat ypsinogen,y ELISA Kit 染料木素/金雀異黃酮 Genistein 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
大鼠胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒RatInsulin,INS 96T/48T 染料木素/金雀異黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Genistein 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠胰島素(INS)試劑盒 Rat Insulin,INS ELISA Kit 木犀草素 Luteolin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR
大鼠胰島素降解酶(IDE)試劑盒 Rat Insulin-degrading Enzyme,IDE ELISA Kit 木犀草素(標(biāo)準(zhǔn)品) Luteolin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA檢測試劑盒RatInsulieceptorβ,ISR-β 96T/48T 熊果酸 Ursolic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥85%,BR
大鼠胰島素受體β(ISR-β)試劑盒 Rat Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT 熊果酸;烏蘇酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Ursolic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
英文名稱HumancalcitoningenerelatedpeptideELISAKit人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)規(guī)格:96T/48T 桑辛素 D HPLC≥95% 20mg
調(diào)料乙醇比色法定量檢測試劑盒20 異粉防己堿N'氧化物 HPLC≥95% 20mg
Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISA試劑盒大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鬃毛酮 HPLC≥95% 20mg
小鼠微精蛋白β(MSMβ)ELISA試劑盒 ,英文名: MSMβ ELISA Kit 香茶菜乙素 HPLC≥95% 20mg
兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測試劑盒RabbitapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 96T/48T 伊博格堿 HPLC≥95% 20mg
牛瘦素(LEP)試劑盒 Bovine Leptin,LEP ELISA Kit 乙酸雷公藤內(nèi)酯A HPLC≥98% 20mg
英文名稱HumanCTELISAKit人降鈣素(CT)規(guī)格:96T/48T 柘樹咕噸酮B HPLC≥95% 20mg
調(diào)料乙酸比色法定量檢測試劑盒20 靈芝酸SZ HPLC≥95% 20mg
Ratplaceagrowthfactor,PLGFELISA試劑盒大鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 銀線草內(nèi)酯醇 HPLC≥95% 20mg
小鼠微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)ELISA試劑盒 ,英文名: MAP1LC3B ELISA Kit 粘毛黃芩素I HPLC≥95% 20mg
人臍動脈平滑肌細(xì)胞說明RatImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒大鼠球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (分析標(biāo)準(zhǔn)品,>97%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>97%(HPLC)
RatImmunoglobulinE,IgEELISAKit大鼠球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三基十四烷基氯化膦 Tributyltetradecylphosphonium chloride 質(zhì)量規(guī)格:50%grade
RatImmunoglobulinE,IgEELISA試劑盒大鼠球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三乙?;?/span>-β-環(huán)糊精(>97.0%(HPLC)) Triacetyl-β-cyclodextrin 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)
RatImmunoglobulinG,IgGELISAKit大鼠球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三乙酸柚皮素酯 HPLC≥98% 5mg
RatImmunoglobulinG,IgGELISA試劑盒大鼠球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三乙四胺-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T)) Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
RatImmunoglobulinM,IgMELISAKit大鼠球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三乙二醇二醚(添加穩(wěn)定劑BHT)(>98.0%(GC)) Triethylene Glycol Dimethyl Ether (stabilized with BHT) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
RatImmunoglobulinM,IgMELISA試劑盒大鼠球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三葉豆紫檀苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Trifolirhizin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Ratinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKit大鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三葉豆紫檀苷 HPLC≥98% 20mg
Ratinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISA試劑盒大鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三葉豆苷 HPLC≥98% 20mg
RatInhibin,INH-AELISAKit大鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三氧化鎢(>99%,BC) Tungsten (VI) oxide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
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