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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷 | T25m2 | CS-963733 |
人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞【Human Aorta:Normal Aortic Endothelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書(shū)僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三葉豆苷 HPLC≥98% 20mg
Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase4,TIMP-4人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三葉豆紫檀苷 HPLC≥98% 20mg
Humaissue-typePlasiminogenActilyse,t-PA人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑根酮C HPLC≥98% 20mg
Human1,25-dihydroxyvitaminD3,DVD/DHVD3ELISA試劑盒人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑根酮D HPLC≥98% 20mg
Human1,3-βDglucosidase,1,3-βD-GluELISA試劑盒人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑皮苷A HPLC≥98% 20mg
Human11-dehydro-thromboxaneB2,11-DH-TXB2ELISA試劑盒人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑皮苷C HPLC≥98% 20mg
Human15-lipoxygenase,15-LO/LOX 人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 桑色素 HPLC≥98% 20mg
Human2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2 人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 桑辛素 HPLC≥98% 20mg
Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISA試劑盒人2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 色胺 HPLC≥98% 20mg
Human25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISA試劑盒人25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 沙蟾毒精 HPLC≥98% 20mg
兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 96T/48T 阿馬靈,阿義馬林 HPLC≥95% 20mg
牛甜菜堿-同型半胱氨酸S-轉(zhuǎn)移酶1(BHMT)試劑盒 Bovine Betaine--homocysteine S-methylansferase 1,BHMT ELISA kit 油菜甾醇 HPLC≥98% 20mg
英文名稱HumandesminELISAKit人結(jié)蛋白(Desmin)規(guī)格:96T/48T 黃花菜木脂素B HPLC≥98% 20mg
調(diào)料三醇比色法定量檢測(cè)試劑盒20 N阿魏羥色胺 HPLC≥98% 20mg
RatPhosphorylatedacetyl-CoAcatboxylase,pACCaseELISA試劑盒大鼠0酸化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 戈米辛H HPLC≥98% 20mg
小鼠圍脂滴蛋白4(PLIN4)ELISA試劑盒 ,英文名: PLIN4 ELISA Kit 齊墩果烯b,b二醇 HPLC≥98% 20mg
兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T 曼陀羅萜醇酮 HPLC≥98% 20mg
牛胎盤生長(zhǎng)因子(PGF)試劑盒 Bovine Placea growth factor,PGF ELISA kit 羥基鐵屎米酮 HPLC≥98% 20mg
英文名稱HumanAmphiregulinELISAKit人角化細(xì)胞因子(AR)規(guī)格:96T/48T 脫氫山楂酸 HPLC≥95% 20mg
調(diào)料谷氨酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20 ,,','四羥基甲氧基黃酮 HPLC≥95% 20mg
人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞直銷RatIerleukin32,IL-32ELISAKit大鼠白介素32(IL-32)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑辛素 T HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin32,IL-32ELISA試劑盒大鼠白介素32(IL-32)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑辛素 M HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin4,IL-4ELISAKit大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑辛素 HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin4,IL-4ELISA試劑盒大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑辛素 D HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin5,IL-5ELISAKit大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑辛素 C HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin5,IL-5ELISA試劑盒大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑色素(標(biāo)準(zhǔn)品) Morin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatIerleukin6,IL-6ELISAKit大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑色素 HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin6,IL-6ELISA試劑盒大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑皮黃素,桑黃酮 HPLC≥98% 5mg
RatIerleukin-7,IL-7ELISAKit大鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑皮苷C HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin-7,IL-7ELISA試劑盒大鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 桑皮苷A(標(biāo)準(zhǔn)品) Mulberroside A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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