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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞操作

人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞操作

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-19 19:17:46瀏覽次數(shù):95次

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人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞操作收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞【Human Intestinal: Normal Intestinal Vein Endothelial Cells產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

產(chǎn)品名稱

人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞操作

規(guī)格

T25m2

貨號

CS-963724

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5
.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2培養(yǎng)。
 Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISA試劑盒人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蛇床子素 HPLC98% 20mg

Humanai-deoxyribonucleaseB,ai-DNaseBELISA試劑盒人抗DNAB抗體(ai-DNaseB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 麝香草酚 GC98% 100mg

Humanaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISA試劑盒人抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 麝香酮 GC98% 0.15ml

Humanai-EJ-aibodyEJ/GlyRSELISA試劑盒人EJ抗體/抗甘氨酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 升麻醇OβD吡喃木糖苷 HPLC98% 10mg

Humanai-Endostatinaibody,ES-AbELISA試劑盒人血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 升麻素 HPLC98% 20mg

Humanai-epidemichemorrhagicfevervirusIgMaibody,EHFIgMELISA試劑盒人抗流行性出血熱病毒抗體IgM(EHF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 升麻素苷 HPLC98% 20mg

Humanai-exactablenuclearaigenaibody,ENA-AbELISA試劑盒人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 升麻酮醇OαL拉伯糖苷 HPLC98% 10mg

Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNP 人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 圣草苷 HPLC98% 20mg

Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNPELISA試劑盒人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 圣草酚 HPLC98% 20mg

Humanai-filaggrinaibody,AFA 人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 十七碳酸甲酯 GC99% 20mg
Rat osteocalcin / bone gla protein (OT/BGP) ELISA Kit 大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 血竭黃烷A HPLC95% 20mg

HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit 人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 羥基,脫氫醉椒素 HPLC95% 20mg

ChickenIerleukin4,IL-4ELISA試劑盒雞白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 新環(huán)桑色烯 HPLC95% 20mg

載玻片細(xì)胞IKB-ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 伽升沃E HPLC95% 20mg

Mouseglucoprotein130,gp130ELISAKit小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基異補(bǔ)骨脂酚 HPLC95% 20mg

小鼠維生素E(VE)ELISA試劑盒 ,英文名: VE ELISA Kit 前胡 A HPLC95% 20mg

小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA檢測試劑盒MousesolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 96T/48T 印度榅桲素 HPLC98% 20mg

人含patatin0脂酶域3(PNPLA3/ADPN/C22orf20)試劑盒 Human PNPLA3/ADPN/C22orf20 ELISA kit 龍膽黃堿 HPLC95% 20mg

RatEndostatin,ESELISAKit大鼠內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 五味子酯丙 HPLC95% 20mg

5MOPS分子生物級濃縮緩沖溶液500毫升 戈米辛S HPLC95% 20mg
人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞操作Rathemeoxygenase1,HO-1ELISAKit大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蛇床子素 HPLC98% 20mg

Rathemeoxygenase1,HO-1ELISA試劑盒大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蛇床子素  Osthole  質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR

Rathemeoxygenase2,HO-2ELISAKit大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蛇床酮 HPLC98% 20mg

Rathemeoxygenase2,HO-2ELISA試劑盒大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蛇床素 HPLC98% 20mg

Rathepaticlipase,HLELISAKit大鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芍藥素  HPLC98% 10mg

Rathepaticlipase,HLELISA試劑盒大鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芍藥內(nèi)酯苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Alibiflorin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC96.50%,標(biāo)準(zhǔn)品

Rathepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit大鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芍藥內(nèi)酯苷 HPLC91.4% 20mg

Rathepatocytegrowthfactor,HGFELISA試劑盒大鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Paeoniflorin  質(zhì)量規(guī)格:>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品

RatHexokinase,HKELISAKit大鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芍藥苷(98%)  Paeoniflorin  質(zhì)量規(guī)格:>98%,高含量易分解

RatHexokinase,HKELISA試劑盒大鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芍藥苷(90%)  Paeoniflorin  質(zhì)量規(guī)格:≥90%

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