我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種，細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范，提供的細(xì)胞株背景清楚，提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

人肺成纖維細(xì)胞【Human Lung: Lung Fibroblast Cells】產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法：
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)犬成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23(FGF23)試劑盒 Canine Fibroblast Growth Factor 23,FGF23 ELISA Kit 油酸甲酯(Standard for GC,≥99%(GC))  Methyl oleate  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99%(GC)

犬雌二醇(E2)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineEsadiol,E2 96T/48T 十一酸甲酯(Standard for GCS,≥99.0%(GC))  Methyl undecanoate  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GCS,≥99.0%(GC)

犬雌二醇(E2)試劑盒 Canine Esadiol,E2 ELISA Kit 正壬烷(standard for GC,≥99.5%(GC))  Nonane  質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.5%(GC)

犬雌激素(E)ELISA檢測(cè)試劑盒Canineesogen,E 96T/48T 正壬醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))  1-Nonanol  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)

犬雌激素(E)試劑盒 Canine esogen,E ELISA Kit 壬酸(Standard for GC ,>99%(GC))   Nonoic acid  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC ,>99%(GC)

犬促黃體生成激素(LH)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineLeinizingHormone,LH 96T/48T 正辛醇(Standard for GC,>99.5%)  n-Octanol  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.5%

犬促甲狀腺素(TSH)試劑盒 Canine Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA Kit 正辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))  n-Octanoic acid  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)

犬促卵泡素(FSH)ELISA檢測(cè)試劑盒Caninefollicle-stimulatinghormone,FSH 96T/48T 十八烷(Standard for GC, ≥99.5% (GC))  Octadecane  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC, ≥99.5% (GC)

犬促卵泡素(FSH)試劑盒 Canine follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit 仲辛醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))  2-Octanol  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)

犬促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)試劑盒 Dog coicoopin releasing hormone,CRH ELISA Kit 二十八烷(standard for GC,≥98.5%(GC))  Octacosane  質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥98.5%(GC)
兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/RLAⅠELISAKit 96T/48T cis宮部苔草酚C HPLC≥95% 20mg

牛纖調(diào)蛋白(FMOD)試劑盒 Bovine fibromodulin,FMOD ELISA Kit 苦參醇E HPLC≥95% 20mg

英文名稱HumanMacrophageInflammatoryProtein-3β,MIP-3βELISAkit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白-3β(MIP-3β)規(guī)格：96T/48T ,'二羥基'甲氧基異黃酮 HPLC≥95% 20mg

電擊法細(xì)胞融合試劑盒10 苦參醇X HPLC≥95% 20mg

RatParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISA試劑盒大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 苦參醇C HPLC≥95% 20mg

小鼠吻素1(KISS1)ELISA試劑盒 ，英文名： KISS1 ELISA Kit O阿魏酰奎尼酸 HPLC≥95% 20mg

兔子可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitsolubleclusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 96T/48T O阿魏?？崴?/span> HPLC≥95% 20mg

牛細(xì)胞色素b-245重鏈(CYBB)試劑盒 Bovine Cytochrome b-245 heavy chain,CYBB ELISA kit 羥基氧化小檗堿 HPLC≥95% 20mg

英文名稱HumanMacrophageInflammatoryProtein-3α,MIP-3αELISAkit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)規(guī)格：96T/48T ,,三羥基H氧雜蒽酮 HPLC≥95% 20mg

電鏡檢測(cè)化學(xué)固著溶液10毫升 ,,三羥基咕噸酮 HPLC≥95% 20mg
人肺成纖維細(xì)胞說(shuō)明Ratfreefattyacids,FFAELISAKit大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十三烷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Tridecane  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)

Ratfreefattyacids,FFAELISA試劑盒大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十三烷(Standard for GC,>99%(GC))  Tridecane  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC)

RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit大鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十七烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))  Heptadecane  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)

RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISA試劑盒大鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十七碳酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  METHYL HEPTADECANOATE  質(zhì)量規(guī)格：內(nèi)標(biāo)

RatFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISAKit大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十七碳酸甲酯 GC≥99% 20mg

RatFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISA試劑盒大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十七碳酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Heptadecanoic acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

RatFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit大鼠游離睪同(F-TESTO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十七碳酸（98%）  Heptadecanoic acid  質(zhì)量規(guī)格：0.98

RatFreeTestoterone,F-TESTOELISA試劑盒大鼠游離睪同(F-TESTO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十七酸 GC≥98% 20mg

RatFreeThyroxine,FT4ELISAKit大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十六烯  GC≥99% 1ml

RatFreeThyroxine,FT4ELISA試劑盒大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十六碳酰胺(>95.0%(GC))  Hexadec*  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。