參數規(guī)格：

產品名稱：轉基因品系棉花MON1445/1698 PCR試劑盒
貨號:CP97091
產品規(guī)格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。

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anti- AMZ1 antibody資源名稱Acinetobacterindicus種屬:Acinetobacterindicus安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:35生長條件:25℃

anti- AMZ2 antibody資源名稱Mucilaginibactermallensis種屬:Mucilaginibactermallensis安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:184

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anti- androgen receptor antibody資源名稱Bacteroidesovatus種屬:Bacteroidesovatus分離基物:人的糞便安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:177生長條件:37℃,厭氧

anti- Angiogenin antibody資源名稱Streptomycesrapamycinicus種屬:Streptomycesrapamycinicus分離基物:土壤安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:130生長條件:28℃

anti- Angiopoietin 1 antibody資源名稱紅假單胞菌屬種屬:Rhodopseudomonas│sp.分離基物:飼料添加劑提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:生產飼料添加劑。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077

anti- Angiopoietin 2 antibody資源名稱蕈狀芽孢桿菌種屬:Bacillus mycoides提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂：牛 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生長條件:37℃，好氧

anti- Angiotensinogen antibody資源名稱變灰青霉種屬:Penicillium canescens提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：20%馬鈴薯汁1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g，硫胺素微量，瓊脂 15g，pH 自然，121℃，15min。生長條件:25-28，好氧生長特性產綠色孢子

anti- Angiotensinogen antibody資源名稱瑞氏青霉種屬:Penicillium raistrickii提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:15α羥化。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0509生長條件:28℃

anti- Angiotensinogen antibody資源名稱化膿鏈球菌種屬:Streptococcus pyogenes提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:無菌實驗，抗菌活性檢測試驗。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:哥倫比亞血平板生長條件:37℃，5%CO2，24h，溶血，球菌，純

anti- ANGL8 antibody資源名稱摩氏變形菌種屬:Proteus morganii提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂：膏 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生長條件:28℃，好氧存儲條件:真空冷凍干燥法

anti- ANGPTL2 antibody資源名稱索氏梭菌種屬:Clostridium│sordellii提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:研究、質量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0121生長條件:37℃

anti- ANGPTL3 antibody資源名稱平滑正青霉（斜面）種屬:Eupenicillium levitum分離基物:泥土提供形式:斜面安全等級:1模式菌株:yes應用領域:用于《含水化妝品中防腐劑標準檢測方法》實驗培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：20%馬鈴薯汁1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g，硫胺素微量，瓊脂 15g，pH 自然。

anti- ANGPTL4 antibody資源名稱病牛沙門氏菌種屬:Salmonella bovis-morbificans提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:研究、質量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生長條件:36℃，好氧

anti- ANGPTL5 antibody資源名稱腸侵襲性大腸埃希氏菌種屬:Escherichia│coli EIEC分離基物:腹瀉病例糞便標本提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:37℃

anti- ANGPTL7 antibody資源名稱糖丁酸梭菌種屬:Clostridium│saccharobutyricum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:提高白酒的丁酸已酯之含量。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0162生長條件:37℃

anti- ANGPTL8 Antibody資源名稱猴頭菌（猴頭，猴頭蘑，猴頭菇）種屬:Hericium│erinaceus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:用于生產食用菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0017生長條件:25℃

anti- ANKLE1 antibody資源名稱蝙蝠蛾擬青霉種屬:Paecilomyces│hepiali提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:藥用，適合液體發(fā)酵法生產菌絲體。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0017生長條件:25℃
轉基因品系棉花MON1445/1698 PCR試劑盒小鼠 ERK Canine CRP(C-Reactive Protein) ELISA Kit0.188ng/ml0.313-20ng/ml

小鼠 Cyt-C Canine Fbg(Fibrinogen) ELISA Kit0.375ng/ml0.625-40ng/ml

小鼠 CYFRA21-1 Canine HP(Haptoglobulin) ELISA Kit0.938ng/ml1.563-100ng/ml

小鼠 CK 18-M65 Canine IFN-γ(Interferon Gamma) ELISA Kit18.75pg/ml31.25-2000pg/ml

小鼠 CK 18-M30 Canine IgE(Immunoglobulin E) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

小鼠 ICAM-3 Canine IgG(Immunoglobulin G) ELISA Kit0.469ng/ml0.781-50ng/ml

小鼠 ICAM-2 Canine IL-10(Interleukin 10) ELISA Kit9.375pg/ml15.625-1000pg/ml