參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱(chēng)：轉(zhuǎn)基因品系棉花COT102探針?lè)╭PCR試劑盒
貨號(hào):CP97077
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。
PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

以下是轉(zhuǎn)基因品系棉花COT102探針?lè)╭PCR試劑盒公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
anti- ADM2 antibody資源名稱(chēng)法國(guó)蜜環(huán)菌（斜面）種屬:Armillaria gallica提供形式:斜面培養(yǎng)物/凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究；生產(chǎn)。食用，藥用。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯提取液 1.0L，葡萄糖 20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O 1.5g，維生素B1 微量，瓊脂 15.0g，pH6.0。生長(zhǎng)條件:25-28℃，好氧

anti- ADNP antibody資源名稱(chēng)擴(kuò)展青霉（斜面）種屬:Penicillium expansum分離基物:水果提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:麥芽膏瓊脂：麥芽膏 20.0g，瓊脂 20.0g，自來(lái)水 1.0L，自然pH。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:25℃，好氧

anti- ADO antibody資源名稱(chēng)淡紫擬青霉（斜面）種屬:Paecilomyces lilacinus提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:脂肪合成。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：20%馬鈴薯汁1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g，硫胺素微量，瓊脂 15g，pH 自然，121℃，15min。生長(zhǎng)條件:28℃，好氧

anti- ADPGK antibody資源名稱(chēng)腐生葡萄球菌腐生亞種種屬:Staphylococcus saprophyticus subsp. saprophyticus提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂：牛膏 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:37℃，好氧

anti- ADRA1A-Specific antibody資源名稱(chēng)串珠鐮刀菌（斜面）種屬:Fusarium moniliforme分離基物:野燕麥提供形式:斜面安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:檢測(cè)抗真菌性能。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。

anti- ADRA1B antibody資源名稱(chēng)緩慢葡萄球菌種屬:Staphylococcus lentus提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:《消毒技術(shù)規(guī)范》規(guī)定的空氣消毒鑒定的代表菌種, 表皮葡萄球菌8032。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂：牛膏 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:37℃，好氧

anti- ADRA2B-Specific antibody資源名稱(chēng)食酸菌屬種屬:Acidovorax sp.分離基物:西沙諾尼成熟果種子內(nèi)提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:LB培養(yǎng)基:：酵母提取物 5.0 g 蛋白胨 10.0 g NaCl 10.0 g 瓊脂 15.0 g 蒸餾水 1.0 L pH 7.0，121℃ 15min。生長(zhǎng)條件:28℃，好氧

anti- ADRB2 antibody資源名稱(chēng)噬瓊膠海水菌種屬:Aquimarina agarlyticus sp. nov.分離基物:石花菜提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:細(xì)菌用海洋液體培養(yǎng)基:2216E：酵母膏 1.0g，蛋白胨 5.0g，F(xiàn)e(III) citrate 0.1g，NaCl 19.45g，MgCl2 5.9g，KCl 0.55g，Na2SO4 3.24g，CaCl2 1.80g，Na2CO3 0.16g，KBr 0.08g，SrCl2 34.0mg，H3BO3 22.0mg，NaSiO3 4.0mg，NaF 2.4g，NH4NO3 1.6mg，Na2HPO4 8mg，蒸餾水 1.0L，pH7.6。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:28℃，好氧

anti- Adrenomedullin antibody資源名稱(chēng)梭形芽孢桿菌屬種屬:Lysinibacillus│sp.分離基物:變味的醋提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長(zhǎng)條件:30℃

anti- ADRM1 antibody資源名稱(chēng)枯草芽孢桿菌黑色變種種屬:Bacillus│subtilis var. niger提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:防霉、抗菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長(zhǎng)條件:28℃

anti- ADRP antibody資源名稱(chēng)球毛殼（斜面）種屬:Chaetomium globosum提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:防霉抗菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:28℃，好氧

anti- ADRP/Perilipin 2 antibody資源名稱(chēng)腸沙門(mén)氏菌腸亞種嬰兒血清型種屬:Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂：膏 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:36℃，好氧

anti- ADSS antibody資源名稱(chēng)野油菜黃單胞菌種屬:Xanthomonas campestris提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:黃原膠生產(chǎn)菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長(zhǎng)條件:30℃，好氧

anti- Advillin antibody資源名稱(chēng)鼠乳桿菌種屬:Lactobacillus murinus分離基物:小鼠腸道提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在益生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0006

anti- AEBP2 antibody資源名稱(chēng)致病性大腸埃希氏菌種屬:Escherichia coli EPEC 026:K60分離基物:烤串提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:NB

anti- AEBP2 antibody資源名稱(chēng)假單胞桿菌種屬:Pseudomonas spices提供形式:凍干粉安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂：膏 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:28℃，好氧，24-48h

anti- AEG-1/MTDH-Specific antibody資源名稱(chēng)雪腐鐮刀菌（斜面）種屬:Fusarium nivale分離基物:雪腐病小麥提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:25~28℃，好氧

anti- AF-6 antibody資源名稱(chēng)林肯鏈霉菌種屬:Streptomyceslincolnensis分離基物:土壤安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)林可霉素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:158生長(zhǎng)條件:26℃
轉(zhuǎn)基因品系棉花COT102探針?lè)╭PCR試劑盒小鼠 IGF-2 Bovine GHRL(Ghrelin) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

小鼠IGF-1R Bovine IGF-1(Insulin-like growth factor 1) ELISA Kit0.469ng/ml0.781-50ng/ml

小鼠 IGF-1 Bovine TLR2(Toll like receptor 2) ELISA Kit0.938ng/ml1.563-100ng/ml

小鼠 ISR-β Bovine TRY(Trypsin) ELISA Kit1.875ng/ml3.125-200ng/ml

小鼠 IDE Bovine PDGFB(platelet-derived growth factor-BB) ELISA Kit28.125pg/ml46.875-3000pg/ml

小鼠 INS Bovine IFNAR1(Interferon alpha/beta receptor 1) ELISA Kit0.188ng/ml0.313-20ng/ml

小鼠 TAP Bovine IL-10(Interleukin 10) ELISA Kit9.375pg/ml15.625-1000pg/ml