實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：轉基因品系水稻KF6染料法qPCR試劑盒
貨號:CP97130
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。

以下是轉基因品系水稻KF6染料法qPCR試劑盒公司正在熱銷的產(chǎn)品：
anti- BCL3 antibody資源名稱Maritimibacteralkaliphilus種屬:Maritimibacteralkaliphilus分離基物:海水，大西洋安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:102生長條件:30℃

anti- BCL6 antibody資源名稱Sphingomonasyunnanensis種屬:Sphingomonasyunnanensis分離基物:受污染的平板安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:28℃

anti- BCL7B antibody資源名稱Massiliaaerilata種屬:Massiliaaerilata分離基物:空氣，韓國安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:108生長條件:28-30

anti- BCMO1 antibody資源名稱多黏類芽孢桿菌種屬:Paenibacillus│polymyxa提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:577生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法

anti- BCO2 antibody資源名稱紡綞形賴氨酸芽孢桿菌種屬:Lysinibacillusfusiformis安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃

anti- BCOR antibody資源名稱耐硼賴氨酸芽孢桿菌種屬:Lysinibacillus│boronitolerans分離基物:海洋沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:223生長條件:35℃

anti- BCR antibody資源名稱少動鞘氨醇單胞菌種屬:Sphingomonas│paucimobilis分離基物:污泥提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:分類、研究，具有用作耐重金屬基因資源潛力。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2

anti- BCRP/ABCG2 antibody資源名稱Acidovoraxsp.種屬:Acidovoraxsp.安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:108生長條件:28℃

anti- BCS1L antibody資源名稱不動桿菌屬種屬:Acinetobactersp.分離基物:Clinicalisolate安全等級:1模式菌株:no應用領域:質量控制菌株培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:37℃

anti- BCS1L antibody資源名稱Brevundimonassp.種屬:Brevundimonassp.安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:108生長條件:28℃

anti- BDH1 antibody資源名稱陰溝腸桿菌（陰溝腸桿菌陰溝亞種）種屬:Enterobactercloacaesubsp.cloacae安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:37℃

anti- BDNF antibody資源名稱產(chǎn)酸克雷伯氏菌種屬:Klebsiella oxytoca分離基物:鹵制品提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:研究、質量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃，15min。

anti- BDNF antibody資源名稱枯草芽孢桿菌枯草亞種種屬:Bacillus subtilis subsp. subtilis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:發(fā)酵產(chǎn)納豆激酶。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁培養(yǎng)基:蛋白胨 5.0g，3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。121℃，15min。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:35-38℃，好氧

anti- Beclin 1 antibody資源名稱遲緩芽孢桿菌種屬:Bacillus│lentus分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:30℃

anti- BEGAIN antibody資源名稱惡臭假單胞菌種屬:Pseudomonas putida分離基物:臨床分離百特醫(yī)療用品公司提供形式:凍干管安全等級:1模式菌株:no應用領域:質量控制菌株培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。

anti- BEND4 antibody資源名稱木糖氧化產(chǎn)堿菌木糖氧化亞種種屬:Alcaligenes│xylosoxidans subsp. xylosoxidans提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:yes應用領域:研究、質量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:37℃

anti- BEND5 antibody資源名稱嗜水氣單胞菌種屬:Aeromonas hydrophila提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:質量控制。Microscan產(chǎn)品質量控制菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃，15min。生長條件:30℃，好氧

anti- BEST1 antibody資源名稱肺炎鏈球菌種屬:Streptococcus pneumoniae分離基物:75歲的男性痰，亞利桑那州鳳凰城提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no應用領域:呼吸研究，質量控制菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:哥倫比亞血平板
轉基因品系水稻KF6染料法qPCR試劑盒小鼠 BDNF Guinea pig IFN-γ(Interferon Gamma) ELISA Kit9.375pg/ml15.625-1000pg/ml

小鼠 BNP Guinea pig IgE(Immunoglobulin E) ELISA Kit0.938ng/ml1.563-100ng/ml

小鼠encephalomyelitis virus(EV)antibody(IgG)Guinea pig IGF-2(Insulin Like Growth Factor 2) ELISA Kit37.5pg/ml62.5-4000pg/ml

小鼠 PDYN Guinea pig IgG(Immunoglobulin G) ELISA Kit0.938ng/ml1.563-100ng/ml

小鼠 PENK Guinea pig IgG1(Immunoglobulin G1) ELISA Kit0.938ng/ml1.563-100ng/ml

小鼠 BGP/Gehrelin Guinea pig IgG2α(Immunoglobulin G2α) ELISA Kit0.469ng/ml0.781-50ng/ml

小鼠visfatin Guinea pig IL-10(Interleukin-10) ELISA Kit37.5pg/ml62.5-4000pg/ml