使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系油菜45A37 PCR試劑盒
貨號:CP97174
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
?實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下是轉(zhuǎn)基因品系油菜45A37 PCR試劑盒公司正在熱銷的產(chǎn)品：
anti- CDC42SE2 antibody資源名稱厚垣普奇尼亞菌種屬:Pochonia│chlamydosporia var. chlamydosporia (Goddard) Zare分離基物:番茄根結(jié)線蟲提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:28

anti- CDC45L antibody資源名稱暗色節(jié)菱孢種屬:Arthrinium│phaeospermum (Corda) M.B. Ellis分離基物:南林351楊提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法

anti- CDC5L antibody資源名稱膠質(zhì)芽孢桿菌種屬:Bacillus│mucilaginosus Avakyan et al提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:141生長條件:30存儲條件:定期移植法

anti- CDC6 antibody資源名稱阿維丁鏈霉菌種屬:Streptomyces│avidinii Stapley et al分離基物:灘涂提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28

anti- CDC6 antibody資源名稱刺槐多年臥孔菌（斜面）種屬:Trametes robiniophila Murrill分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3.0g，七水硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20.0g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件:25℃，好氧

anti- Cdc7 Kinase antibody資源名稱茄褐紋擬莖點霉種屬:Diaporthe│vexans Gratz分離基物:茄子提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:26

anti- CDCA2 antibody資源名稱紅紫韌革菌種屬:Corticium│roseocarneum (Schwein.) Hjortstam提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法

anti- CDCA3 antibody資源名稱側(cè)孢芽孢桿菌種屬:Bacillus│laterespore Laubach分離基物:楊柴根系土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:141生長條件:30

anti- CDCA4 antibody資源名稱細極鏈格孢菌種屬:Alternaria│tenuissima (Kunze) Wiltshire分離基物:果實提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25

anti- CDCA5 antibody資源名稱蘇云金芽孢桿菌多窩亞種種屬:Bacillus│thuringiensis subsp. tolworthi Norris提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30存儲條件:真空冷凍干燥法；定期移植法

anti- CDCA7 antibody資源名稱#銅綠假單孢種屬:Pseudomonas│aeruginosa (Schroeter) Migula分離基物:葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:益生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:141生長條件:32

anti- CDCA8 antibody資源名稱松乳菇（無法提供）種屬:Lactarius│deliciosus (L.) Gray提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法

anti- CDCP1 antibody資源名稱小麥全蝕病種屬:Gaeumannomyces│graminis var. tritici J. Walker分離基物:辣椒葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:植物病原菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14

anti- CDH10-specific antibody資源名稱虎掌菌種屬:Sarcodon│aspratum(Berk.)S.Ito.分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:28

anti- CDH17 antibody資源名稱丁香假單胞桿菌番茄致病變種種屬:Pseudomonas│syringae van Hall pv. tomato (Okabe) Young et al.分離基物:番茄葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:28

anti- CDH23 antibody資源名稱葡萄生鏈格孢種屬:Alternaria│viticola Brunaud分離基物:山葡萄提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法

anti- CDH26 antibody資源名稱樺褐孔菌種屬:Inonotus│obliquus (Ach. ex Pers.) Pilat分離基物:菌核提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:藥用，抗腫瘤，對胃癌，胃潰瘍有療效培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14

anti- CDK1 antibody資源名稱布氏白僵菌（卵孢白僵菌）種屬:Beauveria brongniartii (Sacc.) Petch分離基物:大黑腮金龜提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:鞘翅目昆蟲生物防治培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。
轉(zhuǎn)基因品系油菜45A37 PCR試劑盒小鼠rudimental bovine serum albumin check-up Human SDC1(Syndecan-1) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

小鼠 PRG4 Human CLEC3B(Tetranectin) ELISA Kit0.469ng/ml0.78-50ng/ml

小鼠 PKB Human TFF1(Trefoil factor 1) ELISA Kit9.375pg/ml15.6-1000pg/ml

小鼠 CCK Human TFF2(Trefoil factor 2) ELISA Kit18.75pg/ml31.25-2000pg/ml

小鼠 ChAT Human TFF3(Trefoil factor 3) ELISA Kit46.875pg/ml78.125-5000pg/ml

小鼠 CETP Human TFPI(Tissue factor pathway inhibitor) ELISA Kit18.75 pg/ml31.25-2000pg/ml

小鼠 CH Human TGFα(Transforming Growth Factor α) ELISA Kit9.375pg/ml15.625-1000pg/ml