實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱(chēng)：轉(zhuǎn)基因品系油菜24-18-17染料法qPCR試劑盒
貨號(hào):CP97170
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。

以下是轉(zhuǎn)基因品系油菜24-18-17染料法qPCR試劑盒公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
anti- CD336 antibody資源名稱(chēng)金黃殼囊孢種屬:Cytospora│chrysosperma (Pers.) Fr.分離基物:樹(shù)皮提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25-27

anti- CD34 antibody資源名稱(chēng)針葉樹(shù)散斑殼種屬:Lophodermium│conigenum (Brunaud) Hilitzer分離基物:針葉病斑提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25-27

anti- CD36 antibody資源名稱(chēng)松針散斑殼種屬:Lophodermium│pinastri (Schrad.) Chevall.分離基物:針葉病斑提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:26

anti- CD37 antibody資源名稱(chēng)四川散斑殼種屬:Lophodermium│sichuanense D.X. Qiu & Y.G. Liu分離基物:針葉病斑提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25-27

anti- CD38 antibody資源名稱(chēng)黃白側(cè)耳（姬菇）種屬:Pleurotus│cornucopiae (Paulet) Rolland分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25-27

anti- CD38 antibody資源名稱(chēng)香菇5種屬:Lentinula│edodes (Berk.) Pegler分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:28

anti- CD39 antibody資源名稱(chēng)草芽枝霉種屬:Cladosporium│herbarum (Pers.) Link分離基物:草莓提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:水果保鮮研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14

anti- CD4 antibody資源名稱(chēng)細(xì)交鏈孢霉種屬:Alternaria│tenuis Nees分離基物:杏提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:植物病原真菌；為杏果貯藏和該類(lèi)菌系統(tǒng)學(xué)研究提供依據(jù)。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14

anti- CD4 antibody資源名稱(chēng)尖鐮孢菌種屬:Fusarium│oxysporum Schltdl.分離基物:國(guó)槐幼樹(shù)干部提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:寄生？為幼苗期槐樹(shù)栽植提供依據(jù)。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14

anti- CD40 antibody資源名稱(chēng)美國(guó)大鐘菇種屬:Agricarius│bisporus (Lange) Imbach分離基物:組織塊分離基物斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25

anti- CD41/Integrin alpha 2b antibody資源名稱(chēng)青黃褐硬皮馬勃種屬:Scleroderma│sp.分離基物:組織塊提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25-30

anti- CD42b antibody資源名稱(chēng)地星種屬:Geastrum│sp.分離基物:針葉林提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:藥用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:72

anti- CD43 antibody資源名稱(chēng)褐疣柄牛肝菌種屬:Leccinum│scabrum (Bull.) Gray分離基物:闊葉林提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:食用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:72

anti- CD43 antibody資源名稱(chēng)平田頭菇種屬:Agrocybe│pediades (Fr.) Fayod分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:食、藥用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14

anti- CD44 antibody資源名稱(chēng)薄花邊傘種屬:Psathyrella│candolleana (Fr.) Maire分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:可食用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14

anti- CD44 antibody資源名稱(chēng)可可球二孢（斜面）種屬:Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griffon & Maubl.分離基物:變色木材提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:25℃，好氧。

anti- CD44 antibody資源名稱(chēng)羅氏菌屬種屬:Rothia│sp.分離基物:樹(shù)皮表面提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:141生長(zhǎng)條件:30

anti- CD45 antibody資源名稱(chēng)冬蟲(chóng)夏草（斜面）種屬:Ophiocordyceps sinensis (Berk.) G.H. Sung J.M. Sung Hywel-Jones提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究；教學(xué)。食藥用菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然，121℃，15min。生長(zhǎng)條件:24℃，好氧。生長(zhǎng)特性子座棒狀，生于鱗翅目幼蟲(chóng)體上，一般只長(zhǎng)一個(gè)子座，少數(shù)2-3個(gè)，從寄主頭部、胸中生出至地面。長(zhǎng)5-12cm，基部粗1.5-2cm，頭部圓柱形，褐色，中空。子囊殼橢圓形至卵圓形，基部埋于子座中，330-500μm×138-240μm，子囊長(zhǎng)圓筒形，240-480μm×12-16μm。子囊孢子2-3個(gè)，無(wú)色，線形，橫隔多且不斷，160-470μm×4.5-6μm。自然分布在海拔3000-5000米之間的高山草甸和高山灌叢帶，寄生于蟲(chóng)草蝙蝠蛾(Hepialus armoricanus)的幼蟲(chóng)體上。
轉(zhuǎn)基因品系油菜24-18-17染料法qPCR試劑盒小鼠mycoplasma pneumoniae(MP)antibody(IgG)Human MMP-8(Matrix Metalloproteinase 8) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

小鼠 PARC Human MMP-9(Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit0.188ng/ml0.313-20ng/ml

小鼠 SP-C Human MYD88(Myeloid differentiation primary response protein MyD88) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

小鼠 SP-B Human KLK10/NES1(Kallikrein-10) ELISA Kit0.375ng/ml0.625-40ng/ml

小鼠 SP-A Human NGF/NGFβ(Beta-nerve growth factor) ELISA Kit9.375pg/ml15.6-1000pg/ml

小鼠 SP-D Human NID-1(Nidogen-1/Entactin) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

小鼠 MCT Human NT-3(Neurotrophin-3) ELISA Kit18.75pg/ml31.2-2000pg/ml