參數規(guī)格：

產品名稱：轉基因品系玉米B16探針法qPCR試劑盒
貨號:CP97266
產品規(guī)格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。

以下是轉基因品系玉米B16探針法qPCR試劑盒公司正在熱銷的產品：
anti- FH antibody資源名稱茄科羅爾斯通氏菌種屬:Ralstonia│solanacearum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

anti- FH antibody資源名稱加氏乳桿菌種屬:Lactobacillus gasseri提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g，牛肉粉 8.0g，酵母粉 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，硫酸鎂 0.2 g，乙酸鈉 5.0 g，檸檬酸三銨 2.0 g，磷酸氫二鉀 2.0 g，硫酸錳 0.05 g，吐溫80 1.0 g，蒸餾水 1000mL。pH6.2±0.2。121℃，15min。生長條件:37℃，微好氧

anti- FHIT antibody資源名稱唾液乳桿菌種屬:Lactobacillus salivarius提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g，牛肉粉 8.0g，酵母粉 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，硫酸鎂 0.2 g，乙酸鈉 5.0 g，檸檬酸三銨 2.0 g，磷酸氫二鉀 2.0 g，硫酸錳 0.05 g，吐溫80 1.0 g，蒸餾水 1000mL。pH6.2±0.2。121℃，15min。生長條件:37℃，厭氧

anti- FHIT antibody資源名稱多形擬桿菌種屬:Bacteroides thetaiotaomicron分離基物:人臉提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:；與柳杉花粉熱有關培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:PYG培養(yǎng)基:多胨 5.0 g,胰胨 5.0 g,酵母提取物 10.0 g,葡萄糖 10.0 g,鹽溶液 40.0 ml,蒸餾水 960 ml,瓊脂 10.0 g,pH 7.2 ,鹽溶液： ,CaCl 0.2 g,MgSO4·7H2O 0.4 g,K2HPO4 1.0 g,KH2PO4 1.0 g,NaHCO3 10.0 g,NaCl 12.0 g,蒸餾水 1.0 L 哥倫比亞血平板

anti- FHL1 antibody資源名稱格利菲斯瓦爾德鎮(zhèn)磁螺菌種屬:Magnetospirillum│gryphiswaldense分離基物:river sediment提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:932

anti- Fhl1 antibody資源名稱魯氏少根根霉種屬:Rhizopus arrhizus var. rouxii分離基物:酒曲提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:接合菌門真菌，產糖化酶 生產根霉酒曲培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。

anti- FHL2 antibody資源名稱產黑普雷沃氏菌種屬:Prevotella│melaninogenica分離基物:唾液提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:860生長條件:37℃

anti- FHL3 antibody資源名稱中華石花菌種屬:Mycogelidium│sinense分離基物:子實體組織提供形式:斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:食用菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:17

anti- FHL5 antibody資源名稱紅色毛癬菌種屬:Trichophyton rubrum安全等級:1模式菌株:未知培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件:28℃，好氧

anti- FIBA antibody資源名稱乳酸桿菌種屬:Lactobacillus│分離基物:健康孕婦分泌物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0006生長條件:37℃

anti- FIBCD1 antibody資源名稱假堅強芽孢桿菌（暫無）種屬:Bacillus pseudofirmus提供形式:凍干物/斜面安全等級:1模式菌株:no應用領域:堿性彈性蛋白酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:培養(yǎng)基:成分：大豆蛋白胨 5.0 g，酵母提取物 5.0 g，葡萄糖 10.0 g，K2HPO4 1.0 g，MgSO4·7H2O 0.2 g，NaCl 5.0 g，Na2CO3(單獨滅菌）10.0 g，瓊脂 15.0 g，蒸餾水 1.0 L。121℃，15分鐘滅菌。傳代方法①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無菌水或培養(yǎng)基:充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。 ②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。

anti- FIBP antibody資源名稱戴氏菌種屬:Dyella│sp.分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:土壤微生物學研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:451

anti- fibrillin 2-Specific antibody資源名稱百日咳鮑特菌種屬:Bordetella pertussis提供形式:凍干粉安全等級:2模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:哥倫比亞血平板生長條件:37℃，好氧，48h

anti- Fibrinogen beta chain antibody資源名稱致病性大腸埃希菌種屬:Escherichia│coli提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法

anti- Fibrinogen gamma chain antibody資源名稱熱纖梭菌種屬:Clostridium thermocellum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:嗜熱嚴格厭氧纖維素分解菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:PYC培養(yǎng)基:Casein peptone (tryptic digest) 5.0 g,Peptone 5.0 g,Yeast extract 10.0 g,Cellulose 10.0 g,濾紙條/濾紙漿 適量 ,Distilled water 1.0 L,pH 7.5生長條件:55℃，嚴格厭氧

anti- Fibrinogen gamma chain antibody資源名稱云芝栓孔菌（斜面）種屬:Trametes versicolor提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:云芝多糖,分解木質素, 蛋白酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3.0g，七水硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20.0g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件:25℃，好氧

anti- Fibromodulin antibody資源名稱酸硫桿狀菌種屬:Acidithiobacillus│sp.分離基物:生物除臭塔提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:氧化亞鐵硫桿菌伴生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:24

anti- Fibromodulin antibody資源名稱痢疾志賀菌種屬:Shigella│dysenteriae提供形式:凍干物安全等級:3模式菌株:no應用領域:主要用于分類學研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:37℃
轉基因品系玉米B16探針法qPCR試劑盒大鼠 GFAP Human IL20RA(Interleukin-20 receptor subunit alpha) ELISA Kit0.188ng/ml0.312-20ng/ml

大鼠 NTS Human PIM2(Serine/threonine-protein kinase pim-2) ELISA Kit0.188ng/ml0.313-20ng/ml

大鼠 NRG2 Human SLC17A5(Sialin) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠 NRG1 Human MAGEC1(Melanoma-associated antigen C1) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠 ENA-78 Human HDL(High-density lipoprotein) ELISA Kit46.875ng/ml78.125-5000ng/ml

大鼠 SDH Human PON2(Serum paraoxonase/arylesterase 2) ELISA Kit0.188ng/ml0.312-20ng/ml

大鼠 PEDF Human PON3(Serum paraoxonase/lactonase 3) ELISA Kit0.141ng/ml0.234-15ng/ml