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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞說(shuō)明

人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞說(shuō)明

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產(chǎn)品型號(hào)T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-06-19 19:07:54瀏覽次數(shù):132次

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人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞說(shuō)明收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒(méi)有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞【Human Lung: Vein Smooth Muscle Cells產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

產(chǎn)品名稱

人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞說(shuō)明

規(guī)格

T25m2

貨號(hào)

CS-963707

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4
.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5
.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
3PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2培養(yǎng)。
 Humanai-immunodeficiencyvirusaibody,HIVELISA試劑盒人抗人類缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鼠李糖 HPLC98% 20mg

Humanai-insulieceptoraibody,AIRAELISA試劑盒人抗胰島素受體抗體(AIRA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鼠李糖基羊藿苷II HPLC98% 5mg

HumanAi-keratinaibody,AKAELISA試劑盒人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鼠尾草酚 HPLC98% 20mg

Humanai-livercellmembraneaibody,LMAELISA試劑盒人抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鼠尾草酸 HPLC98% 20mg

Humanai-livercytosolaibodytype1,LC1ELISA試劑盒人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 薯蕷皂苷 HPLC98% 20mg

Humanai-lymphocyteglobulin,ALGELISA試劑盒人抗細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 薯蕷皂苷元 HPLC98% 20mg

Humanai-lymphocytotoxicaibody,ALA/LCAELISA試劑盒人抗細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 薯蕷皂苷元OβD木糖() βD葡萄糖苷  2mg

Humanai-Monocyteaibody,AMAELISA試劑盒人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 雙(甲?;坊┟?/span> HPLC98% 20mg

Humanaimousaibody,HAMAELISA 人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 雙醋瑞因 HPLC98% 20mg

Humanaimousaibody,HAMAELISA人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 雙去氧基姜黃素 HPLC98% 20mg
Ratosteonectin,ONELISA試劑盒大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T O羅漢果苷III HPLC95% 20mg

小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒 ,英文名: ICAM-1/CD54 ELISA Kit 苦木西堿Q HPLC95% 20mg

小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 96T/48T betaO順式對(duì)香豆酰馬期里酸 HPLC95% 20mg

人核糖核酸抑止劑(RNH1/PRI/RNH)試劑盒 Human Ribonuclease inhibitor,RNH1/PRI/RNH ELISA Kit betaO順式對(duì)香豆??屏_索酸 HPLC95% 20mg

RatDesmin,DesELISAKit大鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T betaO反式對(duì)香豆酰馬期里酸 HPLC95% 20mg

3--2-苯并噻唑腙鹽酸鹽(3-methyl-2-benzothiazolinonehydrazone;MBTH)10/20 O順式對(duì)香豆酰委陵菜酸 HPLC95% 20mg

MouseEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISA試劑盒小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 南五味子酸甲酯 HPLC95% 20mg

小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM1)ELISA試劑盒 ,英文名: ICAM1 ELISA Kit 粘毛黃芩素II HPLC95% 20mg

兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 96T/48T ,','三羥基,,氧基黃酮 HPLC95% 20mg

牛血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGFC)試劑盒 Bovine vascular endothelial growth factor C,VEGFC ELISA kit 黃芩黃酮II HPLC95% 20mg
人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞說(shuō)明RatDihydrotestosterone,DHTELISA試劑盒大鼠雙氫睪同(DHT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鼠尾草酮 HPLC95% 20mg

Ratdipeptidylpeptldase,DPPELISAKit大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鼠尾草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Carnosic acid  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Ratdipeptidylpeptldase,DPPELISA試劑盒大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鼠尾草酸 HPLC98% 20mg

RatD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISAKit大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鼠尾草酚酮 HPLC95% 20mg

RatD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISA試劑盒大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鼠尾草酚(標(biāo)準(zhǔn)品)  Carnosol  質(zhì)量規(guī)格:HPLC95%,標(biāo)準(zhǔn)品

Ratdopamine,DAELISAKit大鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鼠尾草酚 HPLC98% 20mg

Ratdopamine,DAELISA試劑盒大鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鼠李糖基羊藿苷II HPLC98% 5mg

Ratdopamineanspoer,DATELISAKit大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鼠李糖苷兒茶酚 HPLC98% 5mg

Ratdopamineanspoer,DATELISA試劑盒大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鼠李糖 HPLC98% 20mg

RatDopamineD1receptor,D1RELISAKit大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 疏展香茶菜寧E HPLC95% 20mg

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