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乙醛脫氫酶(ALDH)紫外分光光度法

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更新時間:2022-04-24 12:01:11瀏覽次數(shù):173次

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進口elisa試劑盒
科研抗體
科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細胞
貨號 GOY-01S6348
乙醛脫氫酶(ALDH)紫外分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA Kit,48T/96T
兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISA Kit,48T/96T
人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA Kit,48T/96T
小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA Kit,48T/96T
大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA Kit,48T/96T

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

28.png 

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

乙醛脫氫酶(ALDH)紫外分光光度法

規(guī)格

50管/48樣

檢測方法

紫外分光光度法

貨號

GOY-01S6348

商品介紹:

測定意義

乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種,廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸,在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動物體內(nèi),線粒體乙醛脫氫酶能把對生物體有害的醇類轉(zhuǎn)化,所以在細胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注;同時,乙醛脫氫酶在分子生物學(xué)以及相關(guān)疾病的檢測方面有較廣泛的研究應(yīng)用。

測定原理

在輔酶Ⅰ存在的條件下,乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH,在340nm處的吸光值會增加,測定340nm處的吸光值變化,可計算得到乙醛脫氫酶的活性。  

自備實驗用品及儀器

天平、離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、蒸餾水。

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔510分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

O-甲基-L- 98%菌唑 分析標準品,98.5%Rabbit Anti-human IgA/HRP  辣根過氧化物標記兔抗人IgA

L-蛋甲酯鹽酸鹽 98%除草標準溶液 100μg/ml,u=4%Rabbit Anti-monkey IgG/HRP  辣根過氧化物標記兔抗猴IgG

D-蛋 99%除草標準溶液 10μg/ml,u=5%Rabbit Anti-monkey IgM/HRP  辣根過氧化物標記兔抗猴IgM

1-甲基-L-組 98%滅菌丹標準溶液 100μg/ml,u=2%Rabbit Anti-mouse IgG/HRP  辣根過氧化物標記兔抗小鼠IgG

L-天冬酰甲酯鹽酸鹽 98%滅菌丹標準溶液 10μg/ml,u=6%Rabbit Anti-mouse IgM/HRP  辣根過氧化物標記兔抗小鼠IgM

N'-甲基-L-組甲酯 98%煙嘧磺隆 95%Rabbit Anti-pig IgG/HRP  辣根過氧化物標記兔抗豬IgG

Fmoc-N-甲基-D-亮 97%惡草酮 分析標準品,97.5%Rabbit Anti-pig IgM/HRP  辣根過氧化物標記兔抗豬IgM

N-Boc-D-蛋 98%惡草酮標準溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:酮Rabbit Anti-rat IgG/HRP  辣根過氧化物標記兔抗大鼠IgG

乙醛脫氫酶(ALDH)紫外分光光度法環(huán)己烯酯 98%Anti-CRHR2/CRFR2  促皮質(zhì)釋放激素受體2抗體人Smad同源物7 (Smad7/MADH7)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

環(huán)己烯酯 ≥98%, FCC, FGAnti-CSIG  衰老抑制因抗體人Sp100核抗原(Sp100)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

楊梅 98%Anti-Cripto-1(NT)  畸胎瘤衍化生長因子抗體(N端)人STAT蛋白抑制因子1(PIAS1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

丁酯 95%Anti-Cripto-1  畸胎瘤衍化生長因子抗體(C端)人STAT蛋白抑制因子3(PIAS3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

龍腦 55%Anti-CSMD1  CSMD1抗體人原鈣黏素β16(PCDHβ16)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

(+)- 分析標準品,≥98% (GC)Anti-CRTAM  CRTAM抗體人V型膠原α2(COL5α2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

桂油 FCCAnti-CSP   環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體人S抗原(SAG)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

小豆蔻油 FCCAnti-C-SKI/v-SKI  C-SKI抗體人TH糖蛋白(THP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

香茅 98%Anti-Calcitonin  降鈣素抗體人43KDa Tar DNA結(jié)合蛋白(TDP43)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

香芹酚 99%Anti-Calcitonin  降鈣素抗體人TATA結(jié)合蛋白(TBP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

2-環(huán)戊環(huán)戊酮 97%Anti-CTBP1  C端結(jié)合蛋白1抗體人TATA框結(jié)合蛋白/TBP相關(guān)因子(TAF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

肉桂 97%Anti-CT DNA (calf thymus DNA)  小牛胸腺DNA 抗體人TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子1(TAF1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

97%Anti-CTGF  結(jié)締組織生長因子抗體人TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子2(TAF2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

正己 standard for GC, ≥99.0% (GC)Anti-CD150/SLAM  信號淋巴活化分子CD150抗體人TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子13(TAF13)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

≥97%, FCC, Kosher, FGAnti-CD151/MER2/PETA-3  CD151抗體人微管關(guān)聯(lián)蛋白(MAPτ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒


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