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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>糖酵解系列>> 葡萄糖6磷酸(6PG)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6622 |
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選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | |
規(guī)格 | 50管/24樣 |
檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 |
貨號(hào) | GOY-01S6622 |
商品介紹:
測(cè)定意義
6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又稱(chēng)6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產(chǎn)物,廣泛存在于動(dòng)植物體和微生物中。在糖酵解的第一步反應(yīng)中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通過(guò)磷酸葡萄糖異構(gòu)酶的催化形成果糖-6-磷酸,以繼續(xù)糖酵解的其它步驟;而在戊糖磷酸途徑中,葡萄糖-6-磷酸是其第一個(gè)底物,該過(guò)程也是生成NADPH的主要途徑。此外,葡萄糖-6-磷酸也能轉(zhuǎn)化形成糖原或淀粉而被儲(chǔ)存起來(lái)。
測(cè)定原理:
6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,在450 nm下測(cè)定吸光值。
需自備的儀器和用品:
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
Anti-TERT/FITC 熒光素標(biāo)記端粒逆轉(zhuǎn)錄抗體IgG
Anti-Tetracycline/FITC 熒光素標(biāo)記四環(huán)素抗體IgG
Anti-Tetraspan5/FITC 熒光素標(biāo)記四分子交聯(lián)體5抗體IgG
Anti-Phospho-TBK1/NAK (Ser172) /FITC 熒光素標(biāo)記NF-κB活化激抗體IgG
Anti-T7 tag/FITC 熒光素標(biāo)記T7 tag標(biāo)簽抗體IgG
Anti-T7 tag/HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記T7 tag標(biāo)簽抗體IgG
Anti-TFF3 /FITC 熒光素標(biāo)記三葉肽因子3抗體IgG
Anti-TFF2/FITC 熒光素標(biāo)記三葉肽因子2抗體IgG
葡萄糖6磷酸(6PG)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒誘蟲(chóng)烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品人EB病衣殼抗原(EBVCA)抗體(IgG)免疫試劑盒電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白脫氫抗體NYS48 NYS48蛋白抗體
誘蟲(chóng)烯 93%人EB病核抗原3A抗體(IgM)免疫試劑盒EGF素受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體NXPH2 神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白2抗體
反-玉米素 98%人EB病核抗原3A抗體(IgG)免疫試劑盒乙激2抗體NXPH1 神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白1抗體
玉米素核苷 97%人EB病核抗原1(EBNA1)抗體(IgG)免疫試劑盒化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體NUSAP1 核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體
兩B 80%,750 μg/mg人EB病IgA(EBv IgA)免疫試劑盒化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體Nurr1 核受體相關(guān)因子-1抗體
鹽倍他司汀 99%人EB病(Ebv)抗體(IgM)免疫試劑盒嗜性粒過(guò)氧化物抗體Nur77/GFRP 孤兒核受體蛋白Nur77抗體
硫 1.5-2.0 units/mg 人EB病(EBv)抗體(IgG)免疫試劑盒核內(nèi)切G抗體NUPR1/p8 核蛋白p8抗體
赫斯特?zé)晒馊剂希?/span>33258 98%人E3泛素蛋白連接TRIM68(TRIM68)抗體免疫試劑盒酪氨蛋白激受體A10抗體NUP88 核孔復(fù)合體蛋白88抗體
3,4-二氧 98%人E3泛素蛋白連接TRIM68(TRIM68)免疫試劑盒胞吐囊復(fù)合體蛋白2抗體NUP54 NUP54抗體
98%人D-脫氫(D-LDH)免疫試劑盒化4E結(jié)合蛋白1抗體NUP50 核孔蛋白50抗體
多烯紫杉 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%人D-免疫試劑盒化絲裂原活化蛋白激1/2抗體NUP37 核孔蛋白Nup37抗體
D-(+)-麥芽糖一水合物 ≥98.0% (HPLC)人D二聚體(D2D)免疫試劑盒泛素交聯(lián)抗體NUP160 核孔蛋白NUP160抗體
美伐他汀 96%人DNA拓?fù)洚悩?gòu)1()自身抗體免疫試劑盒EB病核抗原-3B抗體NUMB 膜相關(guān)蛋白Numb抗體
970 μg/mg (USP XXIV)(劇品)人DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子4樣蛋白(DDIT4/RTP801)免疫試劑盒化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體NuMA 核有絲分裂器NuMA蛋白抗體
鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品人DNA轉(zhuǎn)移3A(DNMT3A)免疫試劑盒乙酰轉(zhuǎn)移EID1抗體NUDEL/NDEL1 中心粒蛋白Nudel抗體
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