血清血漿TaqMan miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒

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血清血漿 TaqMan miRNA 反轉(zhuǎn)錄試劑盒采用加 A 法進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，加 A 法的反轉(zhuǎn)錄效率遠(yuǎn)高于莖環(huán)法，因此，采用該方法可極大的提高檢測(cè)靈敏度（原理見(jiàn)圖 1）。該試劑盒操作簡(jiǎn)單，僅需要兩步即可輕松完成miRNA 的 cDNA 合成，合成的 cDNA 可用于所有 miRNA的后續(xù)定量檢測(cè)。反轉(zhuǎn)錄完畢后采用特異性的上游引物和接頭引物進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，F(xiàn)AM 標(biāo)記 TaqMan 探針作為熒光報(bào)告基團(tuán)進(jìn)行定量檢測(cè)（原理見(jiàn)圖 1）。 的血清血漿 TaqMan miRNA 反轉(zhuǎn)錄試劑盒專用于血清血漿 miRNAs 分子的反轉(zhuǎn)錄試驗(yàn)（不可用于組織和細(xì)胞），轉(zhuǎn)錄獲得的 cDNA 產(chǎn)物用于 TaqMan 定量 PCR 方法檢測(cè) miRNAs 分子（僅適用 TaqMan miRNA 定量 PCR 試劑盒，。
儲(chǔ)存：請(qǐng)置于-20°C，可保存 2 年；避免反復(fù)凍融
操作方法
1 按以下組分在 0.2 ml EP 管中配制應(yīng)液血清血漿 miRNA 10 μl5×TaqMan miRNA RT Solution A 2.5 μl
2 在 PCR 儀上按以下條件進(jìn)行加 A 反應(yīng):37°C 30min　85°C 5min
3 反應(yīng)完畢后，在上述 12.5μl 反應(yīng)體系中加入如下試劑，并混合均勻。
10×PS TaqMan miRNA RT Primer 2.5 μl
10×TaqMan miRNA RT Solution B 2.5 μl
H2O 7.5 μl
4 在 PCR 儀上按以下條件進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)30°C 5min　55°C 60mi　95°C 5min獲得的 cDNA 產(chǎn)物可用于多個(gè)目標(biāo) miRNA 的檢測(cè)。通常取2μl 即可用于 HG TaqMan miRNA 定量 PCR 試劑盒檢測(cè)該試劑盒有一萬(wàn)余種，詳細(xì)列表可查詢HG TaqMan miRNA qPCR kit.xls)。
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