產品屬性：  

商品介紹：

測定意義:

α-KGDH（EC 1.2.4.2）廣泛存在于動物、植物微生物和培養(yǎng)細胞的線粒體中，是三羧酸循環(huán)調控關鍵酶之一，催化α-酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰。

測定原理

α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和生成琥珀酰、 二氧化碳和 NADH，NADH在340 nm有特征吸收峰，以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

注意事項：

①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 （果糖含量測試盒說明書過過濾）。

4 ）. 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。

5 ）. 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

人 TRIM63 基因全長ORF克隆

人 MAGOHB 基因全長ORF克隆

人 PFDN4 基因全長ORF克隆

人 PDRG1 基因全長ORF克隆

人 LSM1 基因全長ORF克隆

人 IFITM3 基因全長ORF克隆

人 RASSF10 基因全長ORF克隆

人 PITX1 基因全長ORF克隆

人 SYT3 基因全長ORF克隆

人 F7 轉錄變體1 基因全長ORF克隆

α酮戊二酸脫氫酶測試盒50管/48樣人循環(huán)免疫復合物(CIC)免疫試劑盒進口、分裝

人血影蛋白(spectrin)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)免疫試劑盒*直銷

人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)免疫試劑盒進口、組裝

人血小板因子3(PF-3)免疫試劑盒進口、分裝

人血小板衍生生長因子CC(PDGF-CC)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

人血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)免疫試劑盒*直銷

人血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)免疫試劑盒進口、組裝

人血小板型果糖激(PFKP)免疫試劑盒進口、分裝

人血小板相關免疫球蛋白(PAIg)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

人血小板相關抗體IgM(PA-IgM)免疫試劑盒*直銷

操作流程：

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。