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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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VEGT-Delisa試劑盒實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵步驟2018/05/21
VEGT-Delisa試劑盒實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵步驟1.重要的洗刷:如果洗刷不充分,會(huì)形成一系列的差異和高布景*終導(dǎo)致試驗(yàn)成果偏差大。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中,那么它會(huì)添加布景噪音。條件答應(yīng)的情況下,恰當(dāng)添加洗刷液中的鹽濃度,這會(huì)阻撓非特異結(jié)合反響。如果布景過(guò)高,置疑洗刷不行時(shí),能夠測(cè)驗(yàn)添加洗刷次數(shù)。2.關(guān)鍵的關(guān)閉:關(guān)閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。ELISA試劑盒這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的時(shí)機(jī)。如果布景過(guò)高,置疑關(guān)閉不充分,那么能夠測(cè)驗(yàn)運(yùn)用更高濃度的關(guān)閉液,或恰當(dāng)延
IL-11elisa試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案2018/05/16
IL-11elisa試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案1.培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞極大可能會(huì)污染,所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。2.細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開(kāi)封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問(wèn)題解決。實(shí)驗(yàn)操作各環(huán)節(jié)小竅門(mén)1、包被原的性質(zhì)
PCDH1elisa試劑盒樣本搜集注意事項(xiàng)2018/05/02
PCDH1elisa試劑盒樣本搜集注意事項(xiàng)1、血清:用無(wú)菌管搜集,室溫血液天然凝固10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保留過(guò)程中如呈現(xiàn)沉積,應(yīng)再次離心。2、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的請(qǐng)求挑選EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保留過(guò)程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)當(dāng)再次離心。3、尿液:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,
白介素elisa試劑盒時(shí)需要注意這幾點(diǎn)2018/04/18
白介素elisa試劑盒時(shí)需要注意這幾點(diǎn)1.正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。2.在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:①固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行
VEGT-Delisa試劑盒測(cè)試中應(yīng)注意哪些問(wèn)題2018/04/16
VEGT-Delisa試劑盒測(cè)試中應(yīng)注意哪些問(wèn)題1、不同的試劑盒因工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性.2、若不同批號(hào)試劑的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。3、加樣時(shí)樣品量誤差,對(duì)于陰或很陽(yáng)的標(biāo)本影響不大,但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響極大,建議校對(duì)加樣器。4、反應(yīng)時(shí)間的誤差,做大量標(biāo)本時(shí),*孔和后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。5、由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器,不排除不同滴頭滴量的誤差
IL-11elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)操作2018/04/09
IL-11elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)操作1.手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。2.自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。說(shuō)明1.在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。2.濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。3
PCDH1elisa試劑盒檢測(cè)Z常用的方法2018/04/08
PCDH1elisa試劑盒檢測(cè)常用的方法(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱(chēng)為"結(jié)合物"(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類(lèi)型的檢測(cè)方法。操作步驟如下:1)將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。2)加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。3)加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免
VEGF-Delisa試劑盒基本步驟2018/03/28
VEGF-Delisa試劑盒基本步驟1、包被用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為110μgml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml4℃過(guò)*。次日棄去孔內(nèi)溶液用洗滌緩沖液洗3次每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌下同)。2、加樣加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3、加酶標(biāo)抗體于各反應(yīng)孔中加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.51小時(shí)洗滌
IL-11elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)背景的問(wèn)題2018/03/26
IL-11elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)背景的問(wèn)題因?yàn)槿绻唇Y(jié)合的材料殘留在微孔板中,ELISA檢測(cè)試劑盒那么它會(huì)增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會(huì)阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過(guò)高,而您懷疑洗滌不夠時(shí),可以嘗試增加洗滌次數(shù)。目前主要有兩種類(lèi)型的封閉液:蛋白和非離子型去污劑。您使用的類(lèi)型須取決于多個(gè)因素,包括微孔板的表面ELISA檢測(cè)試劑盒、吸附的抗原、您的抗體和檢測(cè)試劑。常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定,在去除洗滌過(guò)程中的一些非特異結(jié)合上很有用。但它們只在存在
VEGF-Delisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法2018/03/23
VEGF-Delisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法一、選擇試劑選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。二、加樣可能原因:1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。解決辦法:1)標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-1
PCDH1elisa試劑盒接法和夾心法2018/03/21
PCDH1elisa試劑盒接法和夾心法這類(lèi)反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標(biāo)本也無(wú)色或近于無(wú)色者判為陰性,顯色清晰者為陽(yáng)性。但在ELSIA中,正常人血清反應(yīng)后??沙霈F(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異,因此實(shí)驗(yàn)中必須加測(cè)陰性對(duì)照。陰性對(duì)照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類(lèi)似物。在用肉眼判斷結(jié)果時(shí),更宜用顯色深于陰性對(duì)照作為標(biāo)本陽(yáng)性的指標(biāo)。目視法簡(jiǎn)捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應(yīng)該用比色計(jì)測(cè)定吸光值,這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標(biāo)本(sample,S)、陽(yáng)性對(duì)照(P
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