嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸的氣相色譜測定

嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸的測定（乙酰氯—甲醇甲酯化法）

測定原理：

     乙酰氯與甲醇反應得到的鹽酸—甲醇使試樣中的脂肪和游離脂肪酸甲酯化，用甲苯提取后，經(jīng)嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸檢測色譜儀分離檢測，外標法定量。

本方法依據(jù)《食品安全國家標準GB 5413.27—2010嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸的測定》方法中規(guī)定。

嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸檢測色譜儀儀器和設(shè)備

1、萬分之一電子天平；

2、恒溫熱水浴槽；

3、離心機：轉(zhuǎn)速≥5000 轉(zhuǎn)/分鐘，離心管：50mL；

4、GC-6960氣相色譜儀，帶FID 檢測器，毛細管分流/不分流進樣及尾吹系統(tǒng)；

5、冷凍干燥儀；

6、氮吹儀；

7.、PC2560毛細管柱（100*0.25*0.20）；

測定試劑：

1、；

2、甲苯；

3、乙酰氯；

4、乙酰氯甲醇溶液；

5、碳酸鈉溶液；

6、脂肪酸甘油三酯標準品：純度≥99 %；

測定分析步驟：

1.試樣處理

      試樣含水量大于5%時，冷凍干燥至含水量小于5%。

      稱取試樣0.5 g（精確到0.1 mg）于15 mL 干燥螺口玻璃管中，加入5.0mL甲苯。

       稱取無水奶油試樣0.2g（精確到0.1mg）于15mL干燥螺口玻璃管中，加入5.0mL甲苯。

2.甲酯化提取

2.1試樣測定液的制備

       在試樣中加入10%乙酰氯甲醇溶液6.0mL，充氮氣后，旋緊螺旋蓋，振蕩混合后于80℃±1℃水浴中放置2h，期間每隔20min取出振搖一次，水浴后取出冷卻至室溫。將反應后的樣液轉(zhuǎn)移至50mL離心管中，分別用3.0mL碳酸鈉溶液清洗玻璃管三次，合并碳酸鈉溶液于50mL離心管中，混勻，5000 轉(zhuǎn)/分鐘離心約5min。取上清液作為試液，氣相色譜儀測定。

2.2標準測定液的制備

     準確吸取脂肪酸甘油三酯標準工作液0.5mL于15mL螺口玻璃管中，加入4.5mL甲苯，其他操作步驟同2.1。

色譜參考條件：

色譜柱：PC2560100m×0.25mm，0.20um

氣源：氮氣（99.999%）、氫氣（99.999%）、空氣（99.999%）

載氣流速：1.0mL/min

進樣口溫度：260℃

分流比：30：1

檢測器溫度：280℃

柱溫箱溫度：初始溫度140℃，保持5min，以4℃/min升溫至240℃，保持15min

試樣溶液的測定：

      分別準確吸取1.0μL脂肪酸標準測定液及試樣測定液注入色譜儀，平行測定次數(shù)不少于兩次，以色譜峰峰面積定量。