一、概要
是一類真菌(如黃曲霉和寄生曲霉)的有毒的代謝產(chǎn)物,它們具有很強(qiáng)的致癌性,主要存在于谷物、堅(jiān)果、棉籽以及一些和人類血液、動(dòng)物飼料相關(guān)的產(chǎn)品中。其中B1(AFB1)的毒性、致癌性、污染頻率均居于。薄層色譜一直是檢測(cè)常用的方法,但是此方法制備樣品及分析樣品時(shí)費(fèi)時(shí)又費(fèi)力。而使用B1 ELISA試劑盒則能夠快速而準(zhǔn)確的分析樣品中B1殘留。
本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的新一代真菌毒素檢測(cè)產(chǎn)品,操作時(shí)間短,能限度地減少操作誤差和工作強(qiáng)度。
二、試驗(yàn)原理
本試劑盒采用間接競(jìng)爭ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被B1抗原,樣本中B1和此抗原競(jìng)爭抗B1抗體(抗試劑),同時(shí)抗B1抗體與酶標(biāo)二抗(酶標(biāo)物)相結(jié)合,經(jīng)TMB底物顯色,樣本吸光值與其含有的B1成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中B1的含量。
三、適用范圍
可定性、定量檢測(cè)飼料及飼料原料樣品中B1的含量。
四、交叉反應(yīng)率
AFB1………………………………………………99%
AFB2………………………………………………38%
AFG1………………………………………………27%
AFG2………………………………………………4%
AFM1………………………………………………20%
AFM2………………………………………………<1%
五、樣本前處理步驟
飼料原料及飼料樣本處理方法:
粉碎并稱取樣品置入100mL具塞三角瓶中,加入甲醇混合;于振蕩器上劇烈振蕩;取液體離心;取上清或?yàn)V液,再加入去離子水(稀釋后的液體PH值應(yīng)保證在6~8之間,可用1M“NaOH”或“HCl”進(jìn)行調(diào)節(jié))振蕩,取液分析。
樣品稀釋倍數(shù):1倍
六、操作步驟
1、將所需試劑回溫;
2、取出需要數(shù)量的微孔板;
3、洗滌工作液回溫;
4、編號(hào);
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本;
6、洗板;
7、顯色;
8、測(cè)定。
七、結(jié)果判定
1、粗略判定
2、定量分析
八、檢測(cè)方法檢測(cè)限、回收率、精密度
檢測(cè)限:
飼料原料及飼料成品………………………………2.5µg/kg
回收率:
飼料原料及飼料成品………………………………90±15%
精密度:
試劑盒的變異系數(shù)均小于10%
九、貯藏條件及保存期
貯藏條件:保存試劑盒于2~8℃。
保存期:該產(chǎn)品有效期為12個(gè)月。