ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit |
貨號 | FS-H63211 |
公司“質量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。VacA ELISA Kit 核糖體合成蛋白BOP1抗體
PEB1 ELISA Kit 調節(jié)中心體分離早期相關激酶BORA抗體
klebsiella ELISA Kit 萊姆病螺旋體抗體
CC16 ELISA Kit 成熟相關蛋白BOULE抗體
sTfR ELISA Kit 伸長因子結合蛋白抗體
sTweak ELISA Kit 睪丸特異性堿性蛋白Y2抗體
sTRAIL ELISA Kit 乳腺癌易感基因2相關蛋白抗體
sTNF-R2 ELISA Kit 磷酸化乳腺癌易感基因1抗體
sTNFαR ELISA Kit 磷酸化乳腺癌易感基因1抗體
Sam ELISA Kit 磷酸化上皮鈣粘附分子抗體
sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit 磷酸化乳腺癌易感基因1抗體
SFMC ELISA Kit BRD2蛋白抗體
sVCAM-1 ELISA Kit BRD3蛋白抗體
sEPCR ELISA Kit 磷酸化酪氨酸蛋白激酶6/乳腺腫瘤激酶抗體
VEGFR-2/sFLK-1 ELISA Kit 磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體
sVEGF R1 ELISA Kit 磷酸化EGF應答因子1抗體
TK1 ELISA Kit β細胞素抗體
sAC ELISA Kit 磷酸化BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體
sCKR ELISA Kit ARF鳥苷酸交換因子BIG1抗體
sICAM-1 ELISA Kit 腦特異性同源蛋白BSX抗體
sTREM-1 ELISA Kit 鋅指蛋白47抗體
sLR ELISA Kit BTBD14A蛋白抗體
sLOX-1 ELISA Kit 鋅指蛋白851抗體
sPL-A2 ELISA Kit 嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體
SMRP ELISA Kit 磷酸化c-fos抗體
sMHC-1 ELISA Kit 磷酸化c-fos抗體
sRANKL ELISA Kit 磷酸化原癌基因c-Jun抗體
sRANK ELISA Kit 磷酸化原癌基因c-kit抗體
sFASL ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框148抗體
sAPPα ELISA Kit 細胞毒性T細胞抗原抗體-4抗體
sp185/HER-2 ELISA Kit 鈣調素調節(jié)蛋白相關蛋白抗體
sELAF ELISA Kit 緊密連接蛋白1抗體
Lgals3 ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框149抗體
sHLA-G ELISA Kit 磷酸化原癌基因c-kit抗體
sIL-7R ELISA Kit 磷酸化原癌基因c-kit抗體
sP-selectin ELISA Kit 磷酸化淋巴細胞衍生C-型凝集素抗體
sOX40L ELISA Kit 2號染色體開放閱讀框39抗體
sE-selectin ELISA Kit 2號染色體開放閱讀框49抗體
sENG/sCD105 ELISA Kit 2號染色體開放閱讀框50抗體
B7-2/sCD86 ELISA Kit 科凱恩氏綜合癥相關蛋白/早衰蛋白CSA抗體
sCD44-v9 ELISA Kit 磷酸化細胞角蛋白8抗體
sCD40L ELISA Kit 磷酸化細胞角蛋白8抗體
sCD38 ELISA Kit 磷酸化細胞角蛋白18抗體
sCD30L ELISA Kit 胞粘蛋白2抗體
sCD28 ELISA Kit 細胞色素CPA6抗體
sCD276/sB7-H3 ELISA Kit 細胞色素CYP3A抗體
CR2/sCD21 ELISA Kit 細胞色素cP450 CYP20A1抗體
sCD163 ELISA Kit 細胞色素cP4501B1抗體
HBcAb(IgM) 乙型肝炎核心抗體 IgM 96T
LH 促黃體生成素 96T
FSH 促卵泡生成素 96T
PLH 催乳素 96T
P 孕酮 96T
FT4 游離T4 96T
T3 三碘甲狀腺原氨酸(T3) 96T
Mouse serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit 小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶 96T
G-CSF (Rabbit Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 兔粒細胞集落刺激因子 96T
JNK (Rat c-Jun N-terminal kinases,JNK) ELISA Kit 大鼠c-Jun氨基末端激酶 96T
Fc GammaR II /CD32(Human Receptor II for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR II ) ELISA Kit 人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ 96T
MHC ELISA Kit 魚類主要組織相容性復合體 96T
T4 甲狀腺素(T4) 96T
TSH 人血清促甲狀腺素(TSH) 96T
Anti-TG 甲狀腺球蛋白抗體(TG抗體) 96T
Anti-TM 甲狀腺微粒體抗體(TM抗體) 96T
AFP 甲胎蛋白定量(一/二步夾心法) 96T
AFP 甲胎蛋白定性 96T
CEA 癌胚抗原定量 96T
CEA 癌胚抗原定性(一/二步夾心法) 96T
Ferritin 鐵蛋白 96T
Beta2-MG β2-微球蛋白 96T
PSA 前列腺特異性抗原 96T
CA50 上皮類癌相關抗原 96T
CA125 卵巢癌相關抗原 96T
CA153 乳腺癌相關抗原 96T
CA199 胰腺癌相關抗原 96T
CMV 巨細胞病毒 IgG(間接法二步法)
CMV 巨細胞病毒 IgM(間接法二步法)
CMV 巨細胞病毒 IgM(捕獲法一步法)
CMV IgM 巨細胞病毒 IgM(捕獲法二步法)
RV 風疹胞病毒 IgG(間接法二步法)
RV IgM 風疹胞病毒 IgM(間接法二步法)
RV IgM 風疹病毒 IgM(捕獲法一步法)
Mouse Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit 小鼠乳酸脫氫酶 96T
MHB(Rat Methemoglobin,MHB) ELISA Kit 大鼠高鐵血紅蛋白 96T
Fc GammaR I /CD64(Human Receptor I for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR I ) ELISA Kit 人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ 96T
C3 ELISA Kit 鮭魚補體蛋白3 96T
Alpha2-AP (Rabbit Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit 兔子α2抗纖溶酶 96T
RV IgM 風疹胞病毒 IgM(捕獲法二步法)
TOXO IgG 弓形蟲抗體 IgG(間接法二步法)
TOXO IgM 弓形蟲抗體 IgM(間接法二步法)
TOXO IgM 弓形蟲抗體 IgM(捕獲法一步法)
TOXO IgM 弓形蟲抗體 IgM(捕獲法二步法)
HSV- I IgG 單純皰疹Ⅰ型病毒 IgG(間接法二步法)
HSV- I IgM 單純皰疹Ⅰ型病毒 IgM(間接法二步法)
HSV- I IgM 單純皰疹Ⅰ型病毒 IgM(捕獲法一步法)
HSV- I IgM 單純皰疹Ⅰ型病毒 IgM(捕獲法二步法)
HSV- II IgG 單純皰疹Ⅱ型病毒 IgG(間接法二步法)
HSV- II IgM 單純皰疹Ⅱ型病毒 IgM(間接法二步法)
HSV- II IgM 單純皰疹Ⅱ型病毒 IgM (捕獲法,一步法)
HSV- II IgM 單純皰疹Ⅱ型病毒 IgM (捕獲法,二步法)
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實驗原理Anti-Ins 胰島素抗體(間接法二步法) 96T
Anti-GAD 谷氨酸脫羧酶抗體(間接法二步法) 96T
Ins 胰島素(間接法二步法) 96T
C-Peptide C-肽(夾心法二步法) 96T
破傷風抗體(雙抗原夾心法) 96T
包蟲抗體IgG(間接法二步法)
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準