ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
Bacillus│aryabhattai 阿耶波多氏芽孢桿菌Bacillus│aryabhattai分離基物:樣/海（-1810m，原位富集1年）斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no有機(jī)物降解菌/可降解甘蔗渣（單菌驗(yàn)證）471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Alcanivorax│dieselolei 柴油食烷菌Alcanivorax│dieselolei分離基物:表層海凍干物安全等級(jí):1降解石油烴223生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：≥98%

Brevibacrium│permense 彼爾姆短桿菌Brevibacrium│permense分離基物:沉積物/深海沉積物凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no無機(jī)污染物抗性菌/抗二價(jià)錳Mn 產(chǎn)酶微生物/ 蛋白酶472生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

其它其它 純度：98%

Verticillium│albo-atrum 黃萎輪枝孢Verticillium│albo-atrum凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no棉花黃萎病測(cè)定。91生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：99%

Rhizopus│reflexus 點(diǎn)頭根霉Rhizopus│reflexus凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no產(chǎn)延胡索14生長(zhǎng)條件:25-28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：99%

Rhizopus│cohnii 科恩根霉Rhizopus│cohnii凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no17生長(zhǎng)條件:25-28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：99%

Paecilomyces│sp. 擬青霉Paecilomyces│sp.凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no產(chǎn)生纖維素酶14生長(zhǎng)條件:25-28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：97%
PLCγ1人磷酯酶Cγ鏈ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理Phospho-TLK1 (Ser695)  磷化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體2-芴Mouse DLD (Dihydrolipoyl Dehydrogenase) ELISA Kit  

TLR1  Toll樣受體1抗體水通道蛋白-2抗體2-芴Mouse DLAT (Dihydrolipoyl Transacetylase) ELISA Kit  

TLR2/CD282   Toll樣受體2抗體腫瘤抑制基因ABI2/精氨酪氨蛋白激酶結(jié)合蛋白抗體2-芴Mouse DPPIV (dipeptidyl peptldase IV) ELISA Kit

TLR3   Toll樣受體3抗體ADP核糖基化因子樣11抗體2,5-二甲氧基溴苯Mouse D-LDH (D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit

TLR4/CD284   Toll樣受體4抗體ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體2,5-二甲氧基溴苯Mouse D1R (Dopamine D1 receptor) ELISA Kit

TLR5  Toll樣受體5抗體ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體代磷二苯酯Mouse DRD3 (Dopamine Receptor D3) ELISA Kit

TLR6/CD286   Toll樣受體6抗體ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體代磷二苯酯Mouse DRD4 (Dopamine Receptor D4) ELISA Kit  

TLR9/CD289   Toll樣受體9抗體自噬相關(guān)蛋白10抗體代磷二苯酯Mouse DAT (Dopamine Transporter) ELISA Kit  
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)