檢測(cè)程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測(cè)吸光值。

?
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100µL，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次；
5. 加檢測(cè)溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
?
公司采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無效包退包換，公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。
操作步驟：
1）運(yùn)用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時(shí)參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2）依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來定，能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標(biāo)板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定成果。
9）在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。
BNP elisa試劑盒規(guī)格樣品收集、處理及保存：
1）.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4）血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
石蠟切片總游離膽固醇菲律賓（FILIPIN）熒光間接染色　MADCAM1(Mucosal addressin cell adhesion molecule 1) 　100 ul

石蠟切片總游離膽固醇菲律賓（FILIPIN）熒光直接染色　NEO1(Neogenin) 　20 ul

冰凍切片總游離膽固醇菲律賓（FILIPIN）熒光染色　NAIP(Baculoviral IAP repeat-containing protein 1) 　100 ul

細(xì)胞總膽固醇（酯酶法）菲律賓（FILIPIN）熒光染色　PACRG(Parkin coregulated gene protein) 　100 ul

石蠟切片總膽固醇（酯酶法）菲律賓（FILIPIN）熒光間接染色　CX3CR1(CX3C chemokine receptor 1) 　100 ul

石蠟切片總膽固醇（酯酶法）菲律賓（FILIPIN）熒光直接染色　JUP(Junction plakoglobin) 　20 ul

冰凍切片總膽固醇（酯酶法）菲律賓（FILIPIN）熒光染色　CFL1(Cofilin-1) 　100 ul

細(xì)胞甘油三脂脂酶法格莫瑞（Gomori）染色　EPCA2(Early Prostate Cancer Antigen 2) 　100 ul

石蠟切片甘油三脂脂酶法格莫瑞（Gomori）間接染色　IZUMO1(Izumo sperm-egg fusion protein 1) 　100 ul

石蠟切片甘油三脂脂酶法格莫瑞（Gomori）直接染色　NFATC1(Nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 1) 　20 ul

冰凍切片甘油三脂脂酶法格莫瑞（Gomori）染色　NEO1(Neogenin) 　100 ul

細(xì)胞脂肪酸費(fèi)斯克勒（Fischler）染色　MADCAM1(Mucosal addressin cell adhesion molecule 1) 　20 ul

冰凍切片脂肪酸費(fèi)斯克勒（Fischler）染色　PACRG(Parkin coregulated gene protein) 　100 ul

石蠟切片脂肪酸費(fèi)斯克勒（Fischler）間接染色　CX3CR1(CX3C chemokine receptor 1) 　100 ul

石蠟切片脂肪酸費(fèi)斯克勒（Fischler）直接染色　SNX1(Sorting nexin-1) 　100 ul

細(xì)胞磷脂皮爾斯（Pearse）染色　NAIP(Baculoviral IAP repeat-containing protein 1) 　500 ul
Proteins Induced by Vitamin KAbsense of Antagonist凝血酶原前體蛋白種屬: Alternaria│tomato (Cooke) L. R. Jones番茄交鏈孢霉

Prothrombin precursor (Fragment)凝血酶原前體片段F2提供形式: 20μlpRK2013

coagulation factor Ⅻ凝血因子12種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5a/phA3G-E67/259Q-V5

coagulation factor Ⅱ凝血因子Ⅱ種屬: Pluteus│sp.光柄菇

coagulation factor Ⅶ凝血因子Ⅶ種屬: Actinoplanes│philippinensis菲律賓游動(dòng)鏈霉菌

coagulation factor Ⅷ凝血因子Ⅷ種屬: Rhizobium│sp. (Acacia confusa)小葉相思根瘤菌

coagulation factor Ⅷ related antigen凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原種屬: Helminthosporium│maydis玉蜀黍長蠕孢（玉米小斑病菌）

coagulation factor Ⅸ凝血因子Ⅸ種屬: Ornithinibacillus│sp.鳥氨酸芽孢桿菌

coagulation factorⅩ凝血因子Ⅹ種屬: Microbulbifer│salipaludis鹽沼微跑菌

coagulation factor XI antigen凝血因子Ⅺ抗原種屬: Phomopsis sp.擬莖點(diǎn)霉（斜面）

rudimental bovine serum albumin check-up牛血清白蛋白種屬: Phyllotopsis│nidulans黃毛側(cè)耳

urinary bladder cancer antigen膀胱癌抗原種屬: Pyrrhoderma│scaurum (Lloyd) Ryvarden腫紅皮孔菌

BLCA-4膀胱癌特異性核基質(zhì)蛋白-4種屬: Streptomyces│nashvillensis McVeigh and Reyes納士維爾鏈霉菌

SOX2胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白種屬: Stigmina│carpophila (Lév.) M.B. Ellis嗜果刀孢

Cortactin;EMS1皮動(dòng)蛋白種屬: Ozonium│sp.束絲菌