具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
產(chǎn)品名稱:AQP-5 elisa試劑盒廠家
英文名稱:AQP-5 elisa Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
選擇ELISA試劑盒應從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
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操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
科迪單胞菌(加詞待譯)GIRK2/Kir3.2 G蛋白激活內(nèi)流鉀通道蛋白2抗體100 ul
游海假交替單胞菌AVPR2 精氨酸加壓素受體2抗體100 ul
伯克霍爾德氏菌(加詞待譯)Bdkrb2/B2R 緩激肽B2受體抗體100 ul
微桿菌(加詞待譯)Axin1 軸蛋白1抗體100 ul
太平洋楊氏菌Anei-ATX/Autotaxin 自分泌運動因子抗體100 ul
沉積物大洋球形菌Aurora A/ARK-1/AURKA 有絲分裂激酶A抗體100 ul
解葡聚糖微桿菌Aurora B/STK-1 有絲分裂激酶B抗體100 ul
噬冷菌phospho-PTPRA(Tyr798) 磷酸化酪氨酸磷酸酶α抗體100 ul
肺冢村氏菌phospho-PTPRA(Ser180) 磷酸化酪氨酸磷酸酶α抗體100 ul
約氏生絲單胞菌Aurora C 有絲分裂激酶B抗體100 ul
獨島棲海桿菌Aurora A/B/C 有絲分裂激酶A/B/C抗體100 ul
深海海源菌LEO1 RNA聚合酶相關蛋白LEO1抗體20 ul
康氏菌(加詞待譯)B7-H1/PD-L1/CD274 程序性死亡配體1抗體100 ul
鹽田菌B7-DC/CD273/PDL2 程序性死亡配體2抗體20 ul
鹽棲鹽田菌ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導協(xié)同刺激分子配體CD275抗體100 ul
熱帶海綿桿菌phospho-LEO1(Ser551) 磷酸化RNA聚合酶相關蛋白LEO1抗體100 ul
星箭頭菌ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導協(xié)同刺激分子配體CD275抗體20 ul
芽孢八疊球菌CT054/C20orf54 核黃素轉運蛋白2抗體100 ul
環(huán)-磷酸腺苷(cAMP)分析檢測試劑盒 Kit Rat cAMP Kit 規(guī)格: 96T/48T
環(huán)胞霉素A(CSA)分析檢測試劑盒 Rat Cyclosporin A Kit 規(guī)格: 96T/48T
環(huán)胞霉素A(CSA)分析檢測試劑盒 Rat Cyclosporin A Kit 規(guī)格: 96T/48T
橫紋肌輔肌動蛋白α (Actinin α )分析檢測試劑盒 Rat Actinin α Kit 規(guī)格: 96T/48T
橫紋肌輔肌動蛋白α (Actinin α )分析檢測試劑盒 Rat Actinin α Kit 規(guī)格: 96T/48T
黑色素細胞抗體(manocyte)分析檢測試劑盒 Rat anti-manocyte Kit 規(guī)格: 96T/48T
AQP-5 elisa試劑盒廠家蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 抗草分枝桿菌培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
芽孢桿菌種屬: Bacillus atrophaeus提供形式: 凍干管安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 《消毒技術規(guī)范》規(guī)定的消械對微生物殺滅實驗檢定效果評價標準菌株。培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件: 30.0°C,好氧生長特性: G+,桿菌,運動,精氨酸雙水解酶陰性,吲哚陰性,伏-普實驗、硝酸鹽還原實驗陽性,卵黃反應陰性,發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不發(fā)酵阿拉伯糖、木糖。產(chǎn)生黑色素。嚴格好氧,適pH7.4~7.6。存儲條件: 2-8℃
Pleurotus│ostreatus分離基物: 朽木提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 食用培養(yǎng)基: 14生長條件: 25℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Mesorhizobium│huakuii分離基物: 分離自黃棕壤中生長的紫云英根瘤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 主要用于研究質(zhì)粒之間的相互作用培養(yǎng)基: 63生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Aspergillus│oryzae提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 釀酒用。培養(yǎng)基: CM0085生長條件: 28-30℃存儲條件: 定期移植法;其他
Burkholderia│gladioli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
短密青霉種屬: Penicillumbrevicompatum安全等級: 1模式菌株: no應用領域: fungusresistancetestingectricalandectronicequipment[11793]producesmycophenolicacid[59296]生產(chǎn)酶酚酸培養(yǎng)基: 17生長條件: 24.0°C
Fusarium│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產(chǎn)生抗細菌活性物質(zhì)。培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法