細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號 |
結(jié)腸腺癌細胞:RKO | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細胞系 | GOY-01X0195 |
產(chǎn)品介紹:
名稱 結(jié)腸腺癌細胞:RKO
種屬人類
年齡(性別)不詳
組織來源結(jié)腸癌
生長特性貼壁細胞
細胞形態(tài)上皮細胞樣
背景描述RKO細胞是一個低分化的結(jié)腸癌細胞系。RKO細胞含有野生型p53,但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TRβ1)。RKO細胞的p53蛋白的水平高于RKO-E6細胞,RKO細胞是RKO-E6細胞和RKO-AS45-1細胞的親本細胞系。RKO細胞在裸鼠中成瘤,且在軟瓊脂中形成集落。
生物安全等級1
生長培養(yǎng)基MEM+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例1:3-1:4
推薦換液頻率2~3次/周
倍增時間~21小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性Yes, in nude mice. Yes, in soft agar.
受體表達情況urokinase receptor (u-PAR)
處理方法:
收到細胞后,檢查外包裝是否完整,細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時聯(lián)系。并進行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3. 預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4. 顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5. ①若細胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上,進行傳代。
實驗操作步驟:
a.采用認可的方案處死嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內(nèi)用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得最佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,
避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并*清除殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
人 TNFα 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
人 TNFα 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
人 TNFα 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
人 Integrin beta1 轉(zhuǎn)錄變體1A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
人 PPP1CA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
人 PPP1CA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
人 TGFBR1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
人 BAK1 基因全長O
結(jié)腸腺癌細胞:RKO Aspartate Aminotransferase 谷草轉(zhuǎn)氨抗體 規(guī)格: 0.2mlGoat Anti-human IgG/HRP 辣根過氧化物標記的羊抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
CCL9/CCL10/MIP-1 gamma/SCYA10 巨噬細胞癥蛋白-1γ抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD97 CD97抗體 規(guī)格: 0.1ml
c-ABL1/2(Tyr393/429) 磷酸化非受體激c-Abl抗體 規(guī)格: 0.1ml
FAM89B/MMTV-R 瘤毒受體同源蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151) 磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 規(guī)格: 0.1mlADAR1 (N-terminus) 雙鏈RNA苷酸脫氨基抗體(N端) 0.2ml
ZNF307 鋅指蛋白307抗體 規(guī)格: 0.2mlMammaglobin A 珠蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
CCDC16/ZNF83 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白16抗體 規(guī)格: 0.2ml
CYP2W1 細胞色素P450 2W1抗體 規(guī)格: 0.2ml
5 mg Di-8-ANEPPS Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
2 ug pOTB7 IFIT3 pOTB7 IFIT3 低溫運輸,-20℃保存
OXA添加劑 OXA Additive 1ml/支*5