產(chǎn)品名稱 | 熒光素酶標(biāo)記的人結(jié)腸腺癌細(xì)胞;RKO-Luc | 貨號 | AXB10570 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | RKO-Luc |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候，這時細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠白介素28B(IL-28B)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-28B ELISA Kit
Mouse ierleukin 8 (IL-8/CXCL8) ELISA Kit 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒
ELISA 小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-3(mouse IGBPF-3) 48T/96T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIMA(HumanIschemiaModifiedAlbumin)ELISAKit人缺血修飾白蛋白規(guī)格：48T/96T
通用型胱(cystine)含量比色法?咀?
小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA 試劑盒
Rat maix metalloproteinase 10 (MMP-10) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒
HumanMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
DuckIerferonγ,IFN-γELISA試劑盒鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞組蛋白熒光顯微鏡檢測試劑?咀?
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒
Rat bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 大鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)ELISA試劑盒
HumanPemphigusFoliaceus,PFELISAKit 人落葉型天皰瘡抗體(PF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISA試劑盒人環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織FES激酶活性定量檢測試劑盒(A/?咀?
熒光素酶標(biāo)記的人結(jié)腸腺癌細(xì)胞;RKO-Luc小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA 試劑盒
Human neuraminidase (NA) ELISA Kit 人神經(jīng)酶(NA)ELISA試劑盒
HumanleukocyteaigenE,HLA-EELISAKit 人類白細(xì)胞抗原E(HLA-E)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody,ai-HAVELISA試劑盒人抗甲型肝炎病毒IgM抗體(ai-HAV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物0酸葡萄糖酸脫氫酶(?咀?
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達(dá)效率。
