操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
服务：
我们可以根据您的应用需要，比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求，而量身定制检测试剂盒，有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。
产品名称 | 人吖啶橙(AO)ELISA检测试剂盒 |
英文名称 | People with acridine orange (AO) ELISA Kit |
货号 | YS-P10993 |
试剂配制
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
样本实验前准备：
ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
左旋山莨菪碱 订购|咨询 规格： 20mg
酚-7-葡萄糖苷 16290-07-6 订购|咨询 规格： 10mg
3,4,5-三 1916-07-0 订购|咨询 规格： 20mg
人参皂苷RC 11021-14-0 订购|咨询 规格： 20mg
苹果酸 6915-15-7 订购|咨询 规格： 20mg
莫诺苷 25406-64-8 订购|咨询 规格： 20mg
6627-72-1 订购|咨询 规格： 20mg
柯里拉京 23094-69-1 订购|咨询 规格： 20mg
环氧续随子醇 28649-60-7 订购|咨询 规格： 20mg
黄芪甲苷 84687-43-4 订购|咨询 规格： 20mg
异甘草苷 5041-81-6 订购|咨询 规格： 20mg
3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇 873001-54-8 订购|咨询 规格： 10mg
(-)-丁香树脂酚-4-O-β-D- 1369 订购|咨询 规格： 20mg
紫草酸 28831-65-4 订购|咨询 规格： 20mg
重楼皂苷Ⅶ 76296-75-8 订购|咨询 规格： 20mg
人吖啶橙(AO)ELISA检测试剂盒1张 尼龙膜，13×20 cm Nylon Membrane (Pharmacia) 常温保存
1张 PVDF膜，0.45 μm，13×20 cm PVDF Membrane (Millipore) 常温保存
250mL 氨基黑染膜液 Amido Black 10B BlotStain 避光保存
20L 湿法电转液（干粉） Wet Transfer Buffer Powder 4℃保存
20L 半干法电转液（干粉） Half-Wet Transfer Buffer Powder 4℃保存
100mL Western印迹膜封膜液（尼龙膜） Western Blot Blocking Buffer 4℃保存
100mL Western印迹膜封膜液 (NC膜和PVDF膜) Western Blot Blocking Buffer 4℃保存
100mL 印迹膜抗体稀释液 Antibody Dilution Buffer 4℃保存
50mL Western印迹膜抗体清除剂 Western Blot Antibody Erasol 室温保存
200mL Western印迹膜抗体清除剂 Western Blot Antibody Erasol 室温保存
250mL Western印迹膜洗膜液
100mg 5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸 BCIP -20℃保存
250mg 四氮唑蓝 NBT 4℃避光保存
