服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人前列環(huán)素(PGI)ELISA檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱(chēng) | Human prostacycline (PGI) ELISA Kit |
貨號(hào) | YS-H11945 |
?
試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
亞四氫葉酸還原酶MTHFR抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱(chēng):MTHFR
增殖相關(guān)蛋白MAGOH抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱(chēng):MAGOH
微小染色體維持缺陷蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱(chēng):MCM2
線粒體蛋白18抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱(chēng):MTP18
有絲分裂抑制缺陷蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱(chēng):MAD1
MYCBPAP抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱(chēng):MYCBPAP
多藥耐藥相關(guān)蛋白7抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱(chēng):MRP7
神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱(chēng):MASH1
中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱(chēng):NF-M
利鈉肽受體B抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱(chēng):Natriuretic Peptide Receptor B
非霍奇金淋巴瘤重復(fù)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱(chēng):NHLRC2
NADH脫氫酶黃素蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱(chēng):NDUFV2
腎小球細(xì)胞粘附分子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱(chēng):Nephrin
SNF1/AMP激酶相關(guān)激酶2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱(chēng):NUAK2
人前列環(huán)素(PGI)ELISA檢測(cè)試劑盒大鼠補(bǔ)體片斷5(C5)ELISA試劑盒 英文名: C5 ELISA Kit
大鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒 英文名: C3a ELISA Kit
大鼠補(bǔ)體片斷3(C3)ELISA試劑盒 英文名: C3 ELISA Kit
大鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 英文名: C3 ELISA Kit
大鼠補(bǔ)體C5a(C5a)ELISA試劑盒 英文名: C5a ELISA Kit
大鼠補(bǔ)體C3a(C3a)ELISA試劑盒 英文名: C3a ELISA Kit
大鼠波形蛋白(VIM)ELISA試劑盒 英文名: VIM ELISA Kit
大鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒 英文名: M2-PK ELISA Kit
大鼠丙二酸單酰輔酶A脫羧酶(MLYCD)ELISA試劑盒 英文名: MLYCD ELISA Kit
大鼠丙二酸單酰輔酶A(malonyl CoA)ELISA試劑盒 英文名: malonyl CoA ELISA Kit
大鼠丙二醛(MDA)ELISA試劑盒 英文名: MDA ELISA Kit
大鼠丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)ELISA試劑盒 英文名: ALT ELISA Kit
大鼠丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)ELISA試劑盒 英文名: ALT ELISA Kit
操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。