產(chǎn)品名稱 | 小鼠神經(jīng)細(xì)胞；CATH.a | 貨號(hào) | AXB10493 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | CATH.a：CATHa |
分類 | 小鼠細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹：
生長(zhǎng)特性 | 半貼半懸 |
細(xì)胞形態(tài) | 神經(jīng)細(xì)胞樣 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | RPMI-1640＋8% HS+ 4% FBS＋1% P/S |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | 凍存條件 |
凍存液 | ：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | 培養(yǎng)條件 |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來(lái)凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來(lái)凍存的細(xì)胞開(kāi)始時(shí)方法和平時(shí)一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬(wàn) 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過(guò)度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí)，再放入 -80℃冰箱過(guò)夜(如果沒(méi)有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
PAF(Mouse platelet activating factor) ELISA Kit 小鼠血小板活化因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Cdc6/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
TUNEL 細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒(我公司提供代測(cè)服務(wù)) 50人份
Mitochondrial Pyruvate dehydrogenase kinase 1 英文名稱： 酸脫氫酶激酶1抗體 0.1ml
ATXN3L 英文名稱： 小腦脊髓共濟(jì)失調(diào)蛋白3抗體 0.2ml
Anti-Cdc6/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
iFABP ELISA Kit 大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Acinus(phospho S1180)/FITC 熒光素標(biāo)記腺泡0酸化Acinus抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FGFR3/CD333 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3抗體 規(guī)格 0.1ml
omentin(Mouse omentin) ELISA Kit 小鼠網(wǎng)膜素 96T
MITF 英文名稱： MITF相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.2ml
Aspartate beta hydroxylase 英文名稱： 天門冬酸β羥化酶抗體 0.2ml
Anti-Acinus(phospho S1180)/FITC 熒光素標(biāo)記腺泡0酸化Acinus抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IGFBP-3 ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Apaf-1 /FITC 熒光素標(biāo)記凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM78B FAM78B蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
sCD14 ELISA Kit 大鼠可溶性CD14 96T
MIS12 英文名稱： 染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體 0.2ml
ACAT1 英文名稱： 酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
Anti-Apaf-1 /FITC 熒光素標(biāo)記凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IL-5(Mouse Interleukin 5) ELISA Kit 小鼠白介素5Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CCR-2/5/FITC 熒光素標(biāo)記CC趨化因子受體2/5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EDG1/CD363/S1P1 內(nèi)皮細(xì)胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1抗體 規(guī)格 0.2ml
Amylin (Rabbit Amylin ) ELISA Kit 兔胰淀素 96T
MIR16 英文名稱： 膜蛋白相互作用蛋白R(shí)GS16抗體 0.2ml
3-Apr 英文名稱： 細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白3抗體 0.1ml
Anti-CCR-2/5/FITC 熒光素標(biāo)記CC趨化因子受體2/5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TE ELISA Kit 大鼠端粒酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Ack1/FITC 熒光素標(biāo)記Ack1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FGFR2/CD332 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2抗體 規(guī)格 0.1ml
HNT-4(uman Neurotrophin 4) ELISA KIT 人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4 96T
MIP4 英文名稱： 巨噬細(xì)胞炎癥蛋白18抗體 0.1ml
小鼠神經(jīng)細(xì)胞；CATH.aASIC3 英文名稱： 酸敏感離子通道蛋白3抗體 0.1ml
Anti-Ack1/FITC 熒光素標(biāo)記Ack1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
F VIII Ag(Mouse Factor VIII -related Antigen) ELISA Kit 小鼠第八因子相關(guān)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD57/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD57抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DPY19L2 DPY19L2蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
TOXO IgG 弓形蟲(chóng)抗體 IgG(間接法二步法)
Mineralocorticoid receptor 英文名稱： 鹽皮質(zhì)激素受體抗體 0.2ml
C3orf15 英文名稱： 3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框15抗體 0.2ml
Anti-CD57/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD57抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過(guò)大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí)，吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過(guò)表達(dá)效率。
