產(chǎn)品名稱 | TC-1小鼠肺上皮細胞 | 貨號 | A01X1112 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | TC1:TC-1 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
別稱 | TC-1[JHU-1] |
生長特性 | 貼壁細胞 |
生長培養(yǎng)基 | MEM+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態(tài)好,細胞數(shù)量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
HBcAb(Mouse hepatitis B virus core antibody) ELISA Kit 小鼠乙型肝炎核心抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Caspase-12/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELAVL3/HuC 副綜合癥小腦變性相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Plant zeatin riboside,ZR ELISA Kit 植物玉米索核苷 96T
MLT5 英文名稱: 特異性MLT5蛋白抗體 0.2ml
ACBD6 英文名稱: ?;Y(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 0.2ml
Anti-Caspase-12/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rat reduced glutathione,GSH ELISA Kit 大鼠還原型Multi-class antibodies規(guī)格: 96T
Anti-BDNF/FITC 熒光素標(biāo)記BDNF蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ERK1/2(p44/42 MAPK) 原活化蛋白激酶1/2抗體 規(guī)格 0.1ml
PGR ELISA Kit 大鼠孕酮受體 96T
MLLT11 英文名稱: 髓系/淋巴或混合型白血病11抗體 0.2ml
ASZ1 英文名稱: 錨定蛋白樣蛋白1抗體 0.2ml
Anti-BDNF/FITC 熒光素標(biāo)記BDNF蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse anti-zona pellucida antibody,aZP ELISA Kit 小鼠抗透明帶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-BRCA1(human)/FITC 熒光素標(biāo)記癌易感基因1抗體(人)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EphA6/Eph receptor A6 酪蛋白激酶受體A6抗體 規(guī)格 0.2ml
PROGR ELISA kit 大鼠孕酮受體 96T
MLL5 英文名稱: 髓系/淋巴混合譜系白血病蛋白5抗體 0.2ml
ANKRD9 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體 0.2ml
Anti-BRCA1(human)/FITC 熒光素標(biāo)記癌易感基因1抗體(人)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ICAM-1/CD54 ELISA KIT 大鼠細胞間粘附分子1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti- Phospho-BAP1 (p-Ser592)(human) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人0酸化癌易感基因1抗體(人)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ET-1 內(nèi)皮素-1抗體 規(guī)格 0.1ml
Plant Vitamin D,VD ELISA Kit 植物D 96T
MLK3 英文名稱: 絲酸/蘇酸蛋白激酶MLK3抗體 0.1ml
Angiopoietin 4 英文名稱: 血管生成素3/血管生成素4抗體 0.1ml
Anti- Phospho-BAP1 (p-Ser592)(human) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人0酸化癌易感基因1抗體(人)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ALCAM ELISA Kit 大鼠白細胞活化黏附因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ARF6/FITC 熒光素標(biāo)記ADP核糖基化因子6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM153B FAM153B蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
MHC- III /H-2 III (Mouse major histocompatibility complex- III ) ELISA Kit 小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類 96T
TC-1小鼠肺上皮細胞MLH1 英文名稱: 錯配修復(fù)蛋白1抗體 0.1ml
phospho-alpha Adducin (Thr445) 英文名稱: 0酸化內(nèi)收蛋白抗體 0.1ml
Anti-ARF6/FITC 熒光素標(biāo)記ADP核糖基化因子6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。