公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品介紹:
產(chǎn)品名稱 | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H/10T1/2 | 貨號 | AXB10087 |
規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | C3H/10T1/2 |
分類 | 小鼠細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
細(xì)胞凍存注意事項:
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候,這時細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠B12(VB12)ELISA 試劑盒
Human squamous cell carcinoma aigen 2 (SCCAg-2) ELISA Kit 人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒
HumanOrexinB,OX-BELISAKit 人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISA試劑盒雞L苯解氨酶(PAL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞MY人細(xì)胞系
小鼠間皮素(MSLN)ELISA試劑盒 ,英文名: MSLN ELISA Kit
人對(PABA)ELISA檢測試劑盒Humanpara-aminobenzoicacid,PABAELISAKit 96T/48T
大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)免疫試劑盒 Rat thymus activation regulated chemokine,TARC ELISA Kit
英文名稱RatInsulieceptorβ(ISR-β)ELISAKIT大鼠胰島素受體β(ISR-β)規(guī)格:96T/48T人細(xì)胞系
人血纖蛋白(Fibrin)ELISA 試劑盒
豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒 Pig angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
Humanmonocyteierferongammainducingfactor,MIGFELISAKit 人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA試劑盒人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)人細(xì)胞系
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H/10T1/2兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA 試劑盒
Human hea fatty acid binding protein (h-FABP) ELISA Kit 人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)ELISA試劑盒
Humanai-PL7-aibodyELISAKit 人PL7抗體/抗蘇氨酰NA合成酶(PL7)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanelonginA,EloAELISA試劑盒人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織PIM1激酶活性定量檢人細(xì)胞系