ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | GOD人葡萄糖氧化酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human glucose oxidase, GOD Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63863 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
丁香有效期: 3年溶解性: 50 mg/mlMeOH英文名稱: Syringic acid: 530-57-4
生根有效期: 3年溶解性: 100mg/ml in War英文名稱: Rooting Powd儲(chǔ)存條件: RT
化十六烷基吡一水合物有效期: 2年溶解性: 179mg/mL in War別名: 化十六烷基吡翁一水合物英文名稱: Hexadecylpyridinium chloride monohydra
除草劑 10%溶液英文名稱: Basta: 77182-82-2儲(chǔ)存條件: 2-8℃單位: 瓶
檸檬鐵銨有效期: 2年級(jí)別: CP溶解性: 10 mg/mL in war別名: 2-羥基-1,2,3-丙三羧鐵(III)銨鹽;枸櫞鐵銨
甜菜有效期: 2年溶解性: 1 g/mL in war英文名稱: Betaine: 107-43-7
雨蛙素英文名稱: Caerulein: 17650-98-5分子式: C58H73N13O21S2分子量: 1352.41
化鈉有效期: 3年級(jí)別: AR溶解性: 800mg/mL 水（20℃）英文名稱: SodiuM iodide
GOD人葡萄糖氧化酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理Phospho-WNK1 (Thr60) 賴氨缺陷型蛋白激酶1抗體三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體3--4-苯酚Mouse HSP gp96 (Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit
WNK4 WNK4抗體甲胎蛋白抗體六甘Mouse HSF2 (Heat Shock Tranion Factor 2) ELISA Kit
WNK3 protein 絲氨/蘇氨激酶家族成員的基因WNK3抗體毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體六甘Mouse SHH (Hedgehog Homolog, Sonic) ELISA Kit
Wnt1 信號(hào)通路Wnt1抗體ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體3,5-二羥基苯甲Mouse HHIP (Hedgehog Interacting Protein) ELISA Kit
WDR26 心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體Poly(L-lactide) 1.0 dl/gMouse HLTF (Helicase Like Tranion Factor) ELISA Kit
Wnt3a 信號(hào)通路Wnt3a抗體性鈣調(diào)蛋白3抗體2-氨基-3-溴-5-吡Mouse MMP-3 (Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit
WIP1 原癌基因WIP1抗體磷化CD156b抗體2-氨基-3-溴-5-吡Mouse MMP-9 (Matrix Metalloproteinase-9) ELISA Kit
WNT9A 信號(hào)通路Wnt9a抗體乙脫氫酶5抗體4,6-二(二苯基膦)吩Mouse Pro-MMP-9 (Pro-Matrix Metalloproteinase-9) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
