培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X97359 |
商品介紹:
名稱 小鼠雪旺氏細胞 2.組織來源:神經(jīng)組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 小鼠雪旺氏細胞分離神經(jīng)組織;周圍神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)膠質(zhì)細胞稱施萬(schwann,又名雪旺細胞)細胞,它沿神經(jīng)元的突起分布。施萬細胞包裹在神經(jīng)纖維上,這種神經(jīng)纖維叫有髓神經(jīng)纖維。有髓神經(jīng)纖維和無髓神經(jīng)纖維的施萬細胞的形態(tài)和功能有所差異,施萬細胞的外表面有基膜,能分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子,促進受損的神經(jīng)元的存活及其軸突的再生,參與周圍神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)纖維的構(gòu)成。施萬細胞的胞核呈長卵圓形,其長軸與軸突平行,核周有少量胞質(zhì)。由于施萬細胞包在軸突的外面,故又稱神經(jīng)膜細胞(neurilemmalcell),它的外面包有一層基膜。施萬細胞最外面的一層胞膜與基膜一起往往又稱神經(jīng)膜(neurilemma),光鏡下可見此膜。在有髓神經(jīng)纖維發(fā)生中,伴隨軸突一起生長的施萬細胞表面凹陷成一縱溝,軸突位于縱溝內(nèi),溝緣的胞膜相貼形成軸突系膜(mesaxon)。軸突系膜不斷伸長并反復包卷軸突,把胞質(zhì)擠至細胞的內(nèi)、外邊緣及兩端(即靠近郎氏結(jié)處),從而形成許多同心圓的螺旋膜板層,即為髓鞘。故髓鞘乃成自施萬細胞的胞膜,屬施萬細胞的一部分。施萬細胞的胞質(zhì)除見于細胞的外、內(nèi)邊緣和兩端外,還見于髓鞘板層內(nèi)的施-蘭切跡。該切跡構(gòu)成螺旋形的胞質(zhì)通道,并與細胞外、內(nèi)邊緣的胞質(zhì)相通。 5.方法簡介: ()實驗室分離的小鼠雪旺氏細胞采用-膠原酶混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: ()實驗室分離的小鼠雪旺氏細胞經(jīng)S-100免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M111 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
人抗中性粒細胞胞漿抗體(cANCA)IgM 免疫試劑盒進口、組裝
小鼠胰蛋白-1(trypsin-1)免疫試劑盒進口、分裝
小鼠骨特性堿性C端肽免疫試劑盒進口、分裝
兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒*直銷
人載脂蛋白B100(Apo-B100)免疫試劑盒進口、分裝
人瞬態(tài)電壓感受器陽離子通道,子類V,成員1(TrpV1)免疫試劑盒進口、分裝
人賴氨酰氧化免疫試劑盒進口、分裝
人亨廷頓相關(guān)蛋白1(HAP1)免疫試劑盒進口、分裝
人B細胞連接蛋白(BLNK)免疫試劑盒*直銷
牛核心蛋白聚糖(DCN)?
小鼠雪旺氏細胞Botrytis cinerea 葡萄孢探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CDK8 周期素依賴性激8抗體 規(guī)格: 0.1ml
Ophiostoma novoulmi新榆枯萎病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
Rhizoma cibotii狗脊PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Donkey Anti-Goat IgG/FITC FITC標記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.3ml
Human Immunodeficiency Virus 1(HIV-1M-H)人免疫缺陷病毒1型M群H型RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周MARK2 絲/蘇蛋白激MARK2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Cladosporium carrionii卡氏枝孢霉探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周FAM70A FAM70A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Semen ziziphi spinosae酸棗仁染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Goat Anti-Chicken IgG 羊抗雞IgG 規(guī)格: 1mg
Haplosporidium nelsoni尼氏單孢子蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周NDUFS3 線粒體復合物NDUFS3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Fusarium solani茄病鐮刀探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Band3/CD233 紅細胞陰離子交換蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Medulla junci燈心草LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355) 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 規(guī)格: 0.1ml
Feline Leukemia Virus(FeLV)貓白血病病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-EGFR (Tyr1172) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml