培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X97417 |
商品介紹:
名稱 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 2.組織來源:骨髓 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種除造血干細(xì)胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.001%-0.1%,含量極低。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過程中,受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。 5.方法簡介: ()實驗室分離的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: ()實驗室分離的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R131 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
人肥大細(xì)胞類胰蛋白(MCT)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成抗體(Jo1/HRS)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子/肝素結(jié)合生長因子2(FGF2)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
大鼠可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-2(sTREM-2)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
大鼠CD30分子(CD30)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
改良鹽緩沖液(PSB) 英文名稱:Phosphate Buffered Saline 產(chǎn)品規(guī)格:10ml*20支/包
哥倫比亞培?
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞Canine Leishmaniosis(Canl)犬利什曼原蟲PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周NPY2R 神經(jīng)肽Y受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Porcine Reovirus豬呼腸孤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周CUTA 乙酰酯相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
European Brown Hare Syndrome Virus(EBHSV)歐洲棕色野兔綜合癥病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周STK40 絲/蘇蛋白激40抗體 規(guī)格: 0.2ml
Pseudomonas syringae pv. lachrymans丁香假單胞桿流淚致病變種PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周CK12/Cytokeratin 12 細(xì)胞角蛋白12抗體 0.2ml
Fructus ligustri lucidi女貞子PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周TUBB3/beta III Tubulin(Neuronal Marker) 神經(jīng)細(xì)胞特異性微管蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Aspergillus nidulans構(gòu)巢曲霉LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周RNF24 環(huán)指蛋白24抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rotavirus A輪狀病毒A群探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Goat Anti-rat IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
Cortex dictamni白鮮皮探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
Duck Hepatitis Virus 3(DHV-3)鴨肝炎病毒3型RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周GPR70/T1R1 蛋白偶聯(lián)受體70抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rhipicephalus spp.棕蜱通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Cipar1 前列雄激素抑制信號蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml